| 研究課題/領域番号 |
01570939
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
産婦人科学
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| 研究機関 | 北里大学 |
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研究代表者 |
中居 光生 北里大学, 医学部, 教授 (50050399)
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| 研究分担者 |
飯野 讓二 (飯野 譲二) 北里大学, 医学部, 助手 (30176052)
石川 雅一 北里大学, 医学部, 助手 (40184494)
山浦 昇 北里大学, 看護学部, 助教授 (60050621)
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| 研究期間 (年度) |
1989 – 1991
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| 研究課題ステータス |
完了 (1991年度)
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| 配分額 *注記 |
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1991年度: 300千円 (直接経費: 300千円)
1990年度: 400千円 (直接経費: 400千円)
1989年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
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| キーワード | 腫瘍関連蛋白 / がん発生蛋白 / 妊娠関連蛋白 / 腫瘍マ-カ- / 臨床応用 / 悪性腫瘍 / 血中濃度 / 産婦人科疾患 / 腹水抗原 / 卵巣癌 / 精製 / 特性解析 |
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| 研究概要 |
研究目的1.「高度純化標品の分離」
(1)特異抗体固定化セロファロ-ズカラムクロマトグラフィ-、(2)抗正常ヒト血しょう蛋白固定化セファロ-ズカラムクロマトグラフィ-によって計画通り達成された。この「高度純化標品」は抗原分析の結果はウエスタンブロット法により2.7KDaの分子量をもつことがわかった。本蛋白を単離し、(1)アミノ酸分析、(2)塩基配列の決定を行う研究を現在展開中である。
研究目的2.「単クロ-ン抗体の作製」
(1)高度純化蛋白の凍結乾燥粉末をマウスに免疫した後摘出脾細胞を得た。このBACB/Cマウス細胞とSp2/0ーAg14との細胞融合によりハイブリド-マの増殖、(2)ELISA法による選別、(3)限界希釈法によるクロ-ニング、によって3種の抗体産生細胞を得た。その内の1種はウエスタンブロット法による特異性の解析から分子量1.4KDaの抗原を認識することが明かになった。
研究目的3.「高感度特異的定量法の開発」
上記の分子量1.4KDaの抗原を認識する単クロ-ン抗体を用いてELISA法による体液中可溶性抗原微量定量法の開発に成功した。本法の検量曲線は0.00125U/ml〜25.0U/mlの間で直線性を示す。この検出感度は従来のロケット法の感度である1.5U/mlのおよそ1000倍であって、臨床応用上欠点がない。
「今後の研究課題」
今回作製に成功した単クロ-ン抗体が認識する1.4KDaの腹水抗原を単離した後、本蛋白について、(1)アミノ酸分析、(2)塩基配列の決定、(3)その応用によるELISA法の確立、(4)臨床試料の定量化を実施しその臨床有用性の検証を企図している。結論として、本蛋白の発見および、それに対する単クロ-ン抗体の作製に成功したことは従来の医療水準の格段の進歩に貢献することが大きく期待出来る。
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