| 研究課題/領域番号 |
01570988
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
形態系基礎歯科学
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| 研究機関 | 千葉大学 |
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研究代表者 |
佐藤 研一 千葉大学, 医学部・歯科口腔外科学, 教授 (40009139)
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| 研究分担者 |
白沢 浩 千葉大学, 医学部(第一微生物学), 助手 (00216194)
清水 文七 千葉大学, 医学部(第一微生物学), 教授 (10072894)
金沢 春幸 千葉大学, 医学部(歯科口腔外科学), 講師 (80169549)
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| 研究期間 (年度) |
1989 – 1990
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| 研究課題ステータス |
完了 (1990年度)
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| 配分額 *注記 |
2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
1990年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
1989年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
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| キーワード | 口腔悪性腫瘍 / パピロ-マウイルス / PAP染色 / ABC染色 / サザンブロッティング法 / 口腔領域悪性腫瘍 / in situ hybridization法 / southern blot法 |
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| 研究概要 |
1)良性腫瘍中のHPVの検出
喉頭、咽頭、口腔、副鼻腔領域の良性腫瘍10サンプルについて、Southern blot法、in situ hybridization法、PAP染色でHPV・DNAの検出を行った。2種類のlaryngeal papillomaであるLPーNにはそれぞHPV11、HPV6ゲノムが検出された。LPーT組織標本ではin situ hybridizationでも確認できた。LPーNとLPー1組織標本ではウイルス粒子抗原(L1、L2)をantiーBPV1antibody、antiー6bーL1/βーgal、antibodyantiーL2ーI/βーgal antibodyを用いてPAP染色で容易に確認できた。
さらに、LPー1ではWestern blottingにより、ウイルス粒子蛋白を検出することに成功した。これらの結果はHPVゲノムがepisomeとして存在しウイルス粒子を形成していることを示している。しかし、他のlaryngeal papillomaではHPVDNAも、ウイルス抗原も検出することはできなかった。
2)悪性腫瘍中のHPVーrelated sequenceの検出
口腔、咽頭領域の悪性腫瘍30サンプルについて、Southern blot hybridizationでHPV6/16/18混合DNA、あるいは、HPV1/3/6/11/16/18/33混合DNAをプロ-ブとしてless stringentあるいは、stringentな条件下で、HPV DNAの検出を行った。舌癌と歯肉癌3サンプルからless stringentな条件下において、HPV6/16/18^-DNAsプロ-ベで弱いバンドを検出した。しかし、HPVの型は決定出来なかった。これらの結果はHPVゲノムの小片が宿主DNAに組み込まれている可能性を示唆している。さらにこれらの3種類の癌について、ホルマリン固定組織標本においてin situ hybridizationをHPV6/11、HPV16/18とHPV31/33/35混合DNAプロ-ベを用いて行った。しかし、はっきりした結果は得られなかった。
さらに、5種類の口腔癌由来細胞株についてSouthein blottingを行ったが、陽性の結果は得られなかった。
以上の結果は、口腔領域腫瘍におけるパピロ-マウイルスの病困論的役割を示唆している。
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