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単離平滑筋細胞を用いたムスカリン受容体機構の研究

研究課題

研究課題/領域番号 01571224
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 生物系薬学
研究機関昭和大学

研究代表者

百瀬 和享 (百瀬 和亨)  昭和大学, 薬学部・薬理学教室, 教授 (80004597)

研究分担者 黄 洋一  昭和大学, 薬学部・薬理学教室, 助手 (50228855)
大幡 久之  昭和大学, 薬学部・薬理学教室, 助手 (00119166)
研究期間 (年度) 1989 – 1990
研究課題ステータス 完了 (1990年度)
配分額 *注記
1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
1990年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1989年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
キーワード平滑筋 / ムスカリン受容体 / 単離筋細胞の収縮反応測定法 / 単離平滑筋細胞の調製法 / 平滑筋細胞の収縮様式 / 受容体のアゴニスト親和性 / 筋収縮でのホスファチジン酸の役割 / 細胞内カルシウム動態 / 単離細胞 / コラゲナ-ゼ / パパイン / Gpp(NH)p / ^3H-QNB / モルモット / 回腸縦走筋
研究概要

モルモット消化管平滑筋組織および酵素処理して得られた単離細胞を用いて,ムスカリン受容体の性質、受容体刺激から収縮機構への刺激の伝達、および収縮反応について検討し、以下の成果を得た。
単離平滑筋細胞調製法:平滑筋細胞は、コラゲナ-ゼと微量のパパインで処理することで収縮能を保持した細胞を高得量で得ることが出来た。
収縮反応測定法の開発:位相差顕微鏡およびコンピュ-タを組み合わせて、単離した1個の平滑筋細胞の長径の変化を経時的に記録する方法を開発した。
筋細胞の収縮反応:単離筋細胞の収縮反応は、カルバコ-ルの濃度に依存するgraded typeの収縮様式であった。
しかし、カルバコ-ルに対する感受性および収縮の大きさは、それぞれの細胞で異なっていた。なお、単離した細胞の用量応曲線を平均化すると筋組織のそれに酷似することより、組織内のそれぞれの細胞が発生した張力が集約されて組織の収縮反応として現れることが示唆された。
単離細胞のムスカリン受容体の能能:単離筋細胞のムスカリン受容体は、単離調製時の酵素処理による損傷を受けないことが判明した。また、受容体には、pKiが7.1、5.8、および4.0の3種類あることが明かとなった。この結果は、従来の方法では得られない成果であった。
平滑筋の収縮におけるホスファチジン酸の役割:ムスカリン受容体を刺激すると、phospholipase C およびdiacylglycerol kinase が活性化し、ホスファチジン酸が細胞内に遊離することが判明した。遊離したホスファチジン酸は、カルシウムイオンの細胞内への取り込みを促進して筋収縮をを誘発することが明かとなった。

報告書

(3件)
  • 1990 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1989 実績報告書
  • 研究成果

    (23件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (23件)

  • [文献書誌] Ikuo Maruyama: "Loading of furaー2/AM with an aid of DFP on single smooth muscle cells prepared from guinea pig taenia coli" J. Pharmacol. Methds. 21. 1-12 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ikuo Maruyama: "Effects of pluronic Fー127 on loading of fura 2/AM into single smooth muscle cells isolated from guinea pig taenia coli" J. Toxicol. Sci.14. 153-163 (1989)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hisayuki Lhata: "Phosphatidic acidーinduced conteaction in guineaーpig tainea coli" Res. Comm. Chem. Pathoh. Pharm.68. 329-342 (1990)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hisayuki Ohata: "Role of phosphatidic acid in carbacholーinduced contraction in guinea pig tainea coli" Res. Comm. Chem. Pathol. Pharm.

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] YanーIl Fang: "Agonist binding to muscarinic receptors in single smooth muscle cells is sensitive to temperature"

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] YanーIl Fang: "Meterogeneuscontractile responses and muscarinic receptor binding in single smooth muscle cells from guineaーpig ileum"

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ikuo Maruyama, Hideto Oyamada, Tomohiko Hasegawa, Kazuko Ohtsuka, Mamaoru Kobayashi and Kazutaka Momose: "Loading of fura-2/AM with an aid of DFP on single smooth muscle cells prepared from guinea pig taenia coli." J. Pharmacol. Methods. 21. 1 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ikuo Maruyama, Tomohiko Hasegawa, Toshinori Yamamoto and Kazutaka Momose: "Effect of fluronic F-127 on loading of fura-2/AM into single smooth muscle cells isolated from guineapig taenia coli." J. Toxicol. Sci.14. 153 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hisayuki Ohata and Kazutaka Momose: "Phosphatidic acid-induced contraction in guinea pig taenia coli." Res. Comm. Chem. Pathol. Pharmacol.68. 329 (1990)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hisayuki Ohata, Kouji Nobe and Kzautaka Momose: "Role of phosphatidic acid in carbacholinduced contraction in guinea pig taenia coli." Res. Comm. Chem. Pathol. Pharmacol.

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yen-Il Fang and Kazutaka Momose: "Agonist bindig to muscarinic receptors in single smooth muscle cells is sensitive to temperature."

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yan-Il Fang, Yoshimitsu Komatsu, Hisayuki Ohata, Toshinori Yamamoto and Kazutaka Momose: "Heterogeneous contractile responses and muscarinic receptor binding in single smooth muscle cells from guinea pig ileum."

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ikuo Maruyama: "Loading of furaー2/AM with an aid of DFP on single smooth muscle cells prepared from guinea pig taenia coli" J.Pharmacol.Methods. 21. 1-12 (1989)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Ikuo Maruyama: "Effects of pluronic Fー127 on loading of fura 2/AM into single smooth muscle cells isolated from guinea pig taenia coli" J.Toxicol.Sci.14. 153-163 (1989)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Hisayuki Ohata: "Phosphatidic acidーinduced contraction in guineaーpig tainea coli" Res.Comm.Chem.Pathol.Pharm.68. 329-342 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Hisayuki Ohata: "Role of phosphatidic acid in carbacholーinduced contraction in guinea pig tainea coli" Res.Comm.Chem.Pathol.Pharm.

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] YanーIl Fang: "Agonist binding to muscarinic receptors in single smooth muscle cells is sensitive to temperature"

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] YanーIl Fang: "Meterogeneuscontractile responses and muscarinic receptor binding in single smooth muscle cells from guineaーpig ileum"

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 百瀬和亨: "モルモット瞳孔括約筋の単離平滑筋細胞の調整法ーCollagenaseの検討ー" あたらしい眼科. 6. 589-591 (1989)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Ikuo Maruyama: "Loading of Fura-2/AM with an Aid of DFP on Single Smooth Muscle Cells Prepared from Guinea Pig Taenia Coli" Jounal of Pharmacological Methods. 21. 1-12 (1989)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Kazutaka Momose: "Changes in Contractile Responses of Single Smooth Muscle Cells to Agonists" Journal of Pharmacobio-Dynamics. 12. s-115 (1989)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Ikuo Maruyama: "Effects of Pluronic F-127 on Loading of Fura-2/AM into Single Smooth Muscle Cells Isolated from Guinea Pig Taenia Coli" The Journal of Toxicological Sciences. 14. 153-163 (1989)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Kazuko Ohtsuka: "Differences in QNB Binding between Freshly Isolated and Cultured Single Cells Prepared from Longitudinal Smooth Muscle of Guinea Pig Ileum" The Japanese Journal of Pharmacology. 49. 282 (1989)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書

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公開日: 1989-04-01   更新日: 2016-04-21  

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