| 研究課題/領域番号 |
01571259
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
応用薬理学・医療系薬学
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| 研究機関 | 東京理科大学 |
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研究代表者 |
久保田 和彦 東京理科大学, 薬学部, 教授 (30084411)
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| 研究分担者 |
羽里 忠彦 東京都臨床学総合研究所, 化学療法研究部, 主任研究員 (60109949)
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| 研究期間 (年度) |
1989 – 1990
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| 研究課題ステータス |
完了 (1991年度)
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| 配分額 *注記 |
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1990年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
1989年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
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| キーワード | ベンゾジアゼピン / 受容体 / 内因性リガンド / 牛脳 / 牛脊髄 / 分離 / 牛脊随 / 精製 / 牛背髄 |
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| 研究概要 |
本研究では動物の中枢神経に存在する筈と理論的に予測されている物質で、中枢神経にあるベンゾジアゼピン受容体に選択的に結合するものを探索し、その物質の本体を明らかにせんとした。先ず目的物を分離したとして、それがベンゾジアゼピン受容体に結合するか否かを確認するために、ベンゾジアゼピン受容体分画をマウス脳から調整した。この分画に放射性トリチウムで標識したflunitrazepamを6nM結合させ、別に中枢神経から分離した内因性ベンゾジアゼピンリガンド分画を作用させ、放射性flunitrazepamの置換活性を測ることにより、内因性ベンゾジアゼピンリガンドの量と存在を知ることのできる系を完成させた。
1)ウシ脳から内因性ベンゾジアピンリガンドの検索
ウシの大脳皮質を磨り潰し、アセトン・メタノ-ルで抽出したが、目的リガンドは確認できたものの、充分量とれなかった。
2)ウシ脊髄からの内因性リガンドの分離
ウシ脊髄のホモジネ-トからゲル濾過法などを駆使して内因性リガンドの分離を試みたところ、フラクション47ー49に高い受容体結合親和性を有する物質を確認した。このフラクションに含まれる内因性ベンゾジアゼピンリガンドは分子量1000以下の物質で、少なくとも過去に報告されているジアゼパム、デスメチルジアゼパム、βーカルボリンメチルエステルのいずれでもないリガンドであることが薄層クロマトグラフィ-で確認された。ウシ脊髄から分離した内因性ベンゾジアゼピンリガンドは5種以上存在すること、ペプチドではないことが確認できた。
3)サル脳およびヒト血漿から内因性リガンドの分離
サル脳およびヒト血漿からウシ脊髄と類似の方法で内因性ベンゾジアゼピンリガンドを検出せんとしたが失敗した。
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