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嫌気徴生物の電子キャリア-系とエネルギ-代謝

研究課題

研究課題/領域番号 01580187
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 代謝生物化学
研究機関静岡大学

研究代表者

八木 達彦 (八木 逹彦)  静岡大学, 教育学部, 教授 (00021882)

研究期間 (年度) 1989 – 1990
研究課題ステータス 完了 (1990年度)
配分額 *注記
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1990年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
1989年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
キーワード硫酸還元菌 / 電子キャリア-タンパク / 高分子量シトクロム / ヘムタンパク / ルブルドキシン / アミノ酸配列 / 嫌気的ヘム合成 / シトクロムCー553 / ルブレドキシン / シトクロムcー553 / 電子キャリア- / シトクロムC_3 / シトクロムc-553 / 高分子型シトクロム / Desulfovibrio vulgaris / EPR
研究概要

先年度に引続きDesulfovibrio vulgaris Miyazakiの各種電子キャリア-タンパクのうち,特に高分子量シトクロム(hmc)を中心に構造と酸化還元特性について詳しく研究し,以下の成果を得た。
1.精製法の改良:従来hmc精製除上の変性と分解のため精製収率が著しく低かったが,原因はセファクリルSー200カラムクロマト以前の標品が特に共存プロテア-ゼによる低分子化を受けやすいことをつきとめ,これを避けて高純度hmcを高収率で精製できるようにした.
2.アミノ酸組成とへム含量:定量的アミノ酸分析とスペクトル分析より分子量67000当り12ヘムを含むシングルペプチドである.
3.スペクトル特性:シトクロムC_3と類似し,純度インデクス(還元型A_<553>/A_<280>)は2.6,メチオニンリガンド特有の695nmピ-クは存在しない。Hmcの完全還元ではソレ-領域の差スペクトルは420nmにピ-クがくるが部分還元では424nmと434nmにダブルピ-クが出現した.ヘムの部分還元によるコンフォメ-ション変化による配位状態の変化か,還元除上のハイスピン型出現の可能性等が考えられる。
4.酸化還元特性:Hmcの12ヘムのうち1個はアスコルビン酸で還元される高電位ヘムである.他のへムはhmcーFMNの酸化還元平衝混合物のネルンストプロットよりE^<01>=ー187mV,見かけのn=O.48と測定した.これをもとに,個々のヘムの標準還元電位を計算した.1個の高電位ヘムはHisーHis配位以外の軸リガンドをもつと想定した.Hmcの12ヘムの標準還元電位はこの菌の他の電子キャリア-タンパクの標準電位とこの菌のエネルギ-代謝反応の標準電位をカバ-する.Hmcが電子供与系と硫酸還元系を繋ぐ役割をもつ可能性を示す.
5.部分配列:Hildenborough株hmcとの相同性が認めらたが,シトクロムC,C^3を含め他のタンパクとの近緑性は認められなかった.

報告書

(3件)
  • 1990 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1989 実績報告書
  • 研究成果

    (22件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (22件)

  • [文献書誌] 田坂 千草: "Desulpovibrio vulgaris Miyazakiに存在する高分子型シトクロムC^3の構造と物性" 第41回 タンパク質構造討論会 要旨集. 41. 49-52 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 八木 達彦: "硫酸還元菌Desulfovibrio vulgaris Miyazaki株の膜結合型ヒドロゲナ-ゼの改良精製法" 豊田研究報告. 43. 27-31 (1990)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] A.Nakagawa: "Sーclass cytochromes c have a variety of folding patterns: Structure of cytochrome cー553 from Desulfovibrio vulgaris determined by the multiーwavelength anomalous dispersion method" The Journal of Biochemistry. 108. 701-703 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] C.Tasaka: "Partial sequences of highーmolecularーweight cytochrome c isolated from Desulfovibrio vulgaris Miyazaki" Protein Sequences & Data Analysis. (1991)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 八木 達彦: "Desulfovibrio vnlgaris Miyazakiの可溶性ヒドロゲナ-ゼの精製と物性" 豊田研究報告. 44. (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Yagi: "Microbiology and Biochemistry of Strict Anaerobes Involved in Interspecies Hydrogen Transfer(J.ーP.Belaich,M.Bruschi,and J.ーL.Garcia,EdS.),Part 2,Section 2ー1.Microbiology Electron Carrier proteins in Desulfovibrio vulgaris Miyazaki" Plenum Pubishing Corporation,New York, (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] C. Tasaka, M. Ogata, T. Yagi, and A. Tsugita: "Structure and properties of high-molecular-weight cytochrome C_3 in Desulfovibrio vulgaris." Tanpakushitsu Kozo Toronkai Abstract of Papers. No. 41. 49-52 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T. Yagi: "Improved procedure for the purification of membranebound hydrogenase from Desulfovibrio vulgaris Miyazaki." Reports of Toyoda Physical and Chemical Research Institute. vol. 43. 27-31 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] A. Nakagawa, Y. Higuchi, N. Yasuoka, Y. Katsube, and T. Yagi: "S-class cytochromes c have a variety of folding patterns : Structure of cytochrome c-553 from Desulfovibrio vulgaris dertermined by the multi-wavelength anomalous dispersion method." Journal of Biochemistry. 108. 701-703 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] C. Tasaka, M. Ogata, T. Yagi, and A. Tsugita: "Partial sequences of high-molecular-weight cytochrome c isolated from Desulfovibrio vulgaris Miyazaki." Protein Sequences & Data Analysis. (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T. Yagi, K. Takahashi, and M. Ogata: "Purification and properties of soluble hydrogenase from Desulfovibrio vulgaris Miyazaki." Reports of Toyoda Physical and Chemical Research Institute. vol. 44. (1991)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T. Yagi: "Electron carrier Proteins in Desulfovibrio vulgaris Miyazaki." Plenum Publishing Corporation, N. Y. "Microbiology and Biochemistry of Strict Anaerobes Involvd in Interspecies Hydrogen Transfer" (J. -P. Belaich, M. Bruschi, and J. -L. Garcia, Eds.). 237-248

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 田坂 千草: "Desulfovibrio vulgaris Miyazakiに存在する高分子型シトクロムc_3の構造と物性" 第41回 タンパク質構造討論会要旨集. 41. 49-52 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 八木 達彦: "硫酸還元菌Desulfovibrio vulgaris Miyazaki株の膜結合型ヒドロゲナ-ゼの改良精製法" 豊田研究報告. 43. 27-31 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] A.Nakagawa: "Sーclass cytochromes c have a variety of folding patterns:Structure of cytochrome cー553 from Desulfovibrio vulgaris determined by the multiーwavelength anomalous dispersion method" The Journal of Biochemistry. 108. 701-703 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] C.Tasaka: "Partial sequences of highーmolecularーweight cytochrome c isolated from Desulfovibrio vulgaris Miyazaki" Protein Sequences & Data Analysis. (1991)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 八木 達彦: "Desulfovibrio vulgaris Miyazakiの可溶性ヒドロゲナ-ゼの精製と物性" 豊田研究報告. 44. (1991)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] T.Yagi: "Microbiology and Biochemistry of Strict Anaerobes Involved in Interspecies Hydrogen Transfer (J.ーP.Be^^´laich,M.Bruschi,and J.ーL.Garcia,Eds.),Part 2,Section 2ー1.Microbiology Electron carrier proteins in Desulfovibrio vulgaris Miyazaki(pp.237ー248)" Plenum Publishing Corporation,New York, 543 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] A.L.Verma: "SERR evidence for enzymatic reduction of cytochrome c_3 adsorbed on Ag colloids" Chemical Physics Letters. 159. 189-192 (1989)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Hafeda Benosman: "EPR study of the redox interons in cytochrome c_3 from Desulfovibrio vulgaris Miyazaki" European Journal of Biochemistry. 182. 51-55 (1989)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Fusae Shimizu: "Amino acid sequence and function of rubredoxin from Desulfovibrio vulgaris Miyazaki" Biochimie. 72. 1171-1175 (1989)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Tatsuhiko Yagi: "Microbiology and Biochemistry of Strict Anaerobes Involved in Interspecies Hydrogen Transfer" Plenum Press,New York,

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書

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公開日: 1989-04-01   更新日: 2016-04-21  

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