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病原因子を指標にした下痢原因菌の迅速な免疫学的検出法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 01870020
研究種目

試験研究(B)

配分区分補助金
研究分野 細菌学
研究機関大阪大学

研究代表者

三輪谷 俊夫  大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (60029759)

研究分担者 坂本 雅子  財団法人阪大微生物病研究会, 係長
有田 美知子  大阪大学微生物病研究所, 助手 (10127178)
余 明順  大阪大学微生物病研究所, 助手 (70093482)
山本 耕一郎  大阪大学微生物病研究所, 助手 (30158274)
本田 武司  大阪大学微生物病研究所, 助教授 (60029808)
研究期間 (年度) 1989 – 1990
研究課題ステータス 完了 (1990年度)
配分額 *注記
11,000千円 (直接経費: 11,000千円)
1990年度: 3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
1989年度: 7,600千円 (直接経費: 7,600千円)
キーワード病原因子 / 毒素 / 定着因子 / 腸炎ビブリオ / 毒素原性大腸菌 / コレラ菌 / 抗体 / ELISA / 線毛 / 蛋白毒素
研究概要

本研究の目的を遂行するための最も重要な点は、主要な腸管感染病原因子を特定し、分離精製を行い、さらに特異抗体を作成すること、そして、これらを用いて種々の病原因子の免疫学的検出法を開発することである。病原因子としては、感染発症に必要な(1)定着因子、(2)毒素に注目して研究をすすめた。その結果、本補助金により、当研究室で行ってきた研究成果の他に新たに、下記の病原因子について上記の目的をほぼ達成することが出来た。
1.定着因子
(1)Enterotoxigenic.E.coli の CFA/ll、CFA/lll
(2)Vibrio cholerae 01およびnonー01のHemagglutinin
(3)Aeromonas hydrophilaの線毛
2.毒素
(1)Virio parahaemolyticusのTDH/TRH family毒素
(2)Vibrio hollisaeのTDH類似毒素
(3)Enterotoxigenic E.coliのSTおよびLTエンテロトキシン
(4)Vibrio choleraeのElーTor型溶血毒
(5)Vibrio metschnikoviiのCytolysin
(6)Bacillus cereusの溶血毒
上述の病原因子のポリクロ-ナルおよびモノクロ-ナル抗体を組み合せたEIA系を主として開発し、免疫学的な病原因子の検出系を確立し、さらにこれらの系を用いた応用的研究もすすめた。

報告書

(3件)
  • 1990 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1989 実績報告書
  • 研究成果

    (78件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (78件)

  • [文献書誌] Honda,T.et Al.: "Purification of a TDHーrelatedhemolysin produced by a Kanagawa phenomennーnegative clinical isolate of Vibrio parahaemolyticus 06:K46." FEMS Microbiol.Lett.57. 241-246 (1989)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] MiYake,M.et al.: "Effect of divalent cations and saccharides on Vibrio metshnikovii cytolysinーinduced hemolysis of rabbit erythrocytes." Infect.lmmun.57. 158-163 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda,T.et al.: "Purification and characterization of the CS2 pili of colonizationll factor antigen produced by human enterotoxigenic Escherichia coli." Microbiol.Immunol.33. 265-275 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sato,M.et al.: "Characterization of a pilus produced by Aeromonas hydrophila." FEMS Microbiol.Lett.59. 325-330 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda,T.et al.: "Production of monoclonal antibodies against thermostable direct hemolysin of of Vibrio parahaemolyticus and application of the antibodies for enzymeーlinked immunosorbent assay." Med.Microbiol.Immunol. 178. 245-253 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda,T.et al.: "A mutant hemolysin with lower biological activity produced by a mutant Vibrio parahaemolyticus." FEMS Micrbiol Lett.61. 95-100 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoh,M.et al.: "Homogeneity of a hemolysin (VhーrTDH) produced by clinical and environmental isolates of Vibrio hollisae" FEMS Microbiol.Lett.61. 171-176 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishibuchi,M.et al: "Cloning and uncleotide sequence of the gene(trh) encoding the hemolysin related to the thermostable direct hemolysin of Vibrio parahaemolyticus." Infect.Immun.57. 2691-2697 (1989)

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  • [文献書誌] Nishibuchi,M.et al.: "Detection with synthtic oligonucleotide probes of nucleotide sequence variations in the genes encoding enterotoxins of Escherichia coli." J.Clin.Microbiol.27. 2272-2276 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda,T.et al.: "Evidence of immunologic crossーreactivity between hemolysins of Vibrio hollisae and Vibrio parahaemolyticus demonstrated by monoclonal antibodies." J.Infect.Dis.160. 1089-1090 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoh,M.et al.: "Comparative amino acid sequence analysis of hemolysins produced by Vibrio hollisae and Vibrio.parahaemolyticus." J.Bact.171. 6859-6861 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda,T.et al.: "Purification and Characterization of a protease produced by Vibrio cholerae nonー01 and comparison with a protease of V.cholerae 01." Infect.Immun.57. 2799-2803 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda,T.et al.: "Production and characterization of monoclonal antibodies to a pilus colonization factor(colonization factor antigen lll) of human enterotoxigenic Escherichia) coli." Infect.Immun.57. 3452-3457 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishibuchi,M.et al.: "Comparative analysis of the hemolysin genes of Vibrio cholerae nonー01,V.mimicus and V.hollisae that are similar to the gene of V.parahaemolyticus." FEMS Microbiol.Lett. 67. 251-256 (1990)

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  • [文献書誌] Honda,T.et al.: "Production of monoclonal antibody against a hemolysin (VpーTRH) produced by Vibrio parahaemolyticus." FEMS Microbiol,Lett.68. 167-170 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Joya,J.et al.: "Demonstration of enterotoxigenic Escherichia coli in diarrheic broiler chicks." Eur.J.Epidemiol.6. 88-90 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Miwatani,T.et al.: "Bacterial etiology of infantile diarrhoea in Papua New Guinea." J.Trop.Pediat.36. 101-103 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Iida,T.et al.: "Cloning and expression of two genes encoding highly homologous hemolysins from a Kanagawaーphenomenonーpositive Vibrio parahaemolyticus T4750 strain." Gene. 93. 9-15 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yamamoto,K.et al.: "The cytolysin gene of Vibrio vulnificus: Squence and relationship to the Vibrio cholerae E1 Tor hemolysin gene" Infect.Immun.58. 2706-2709 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yamamoto,K.et al.: "Twoーstep processing for activation of cytolysin/hemolysin of Vibrio cholerae 01,E1 Tor:nucleotide sequence of the structural gene and (hlyA) and characterization of the processed products." Infect.Immun.58. 4106-4116 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoh,M.et al.: "Characterization of thermostable direct hemolysin encoded by four representative tdh genes of Vibrio parahaemolyticus." Microbial Pathogenesis.

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Arita,M.et al.: "Purification and characterization of a new heatーstablenterotoxin produced by Vibrio cholerae nonー01 serogroup Hakata." FEMS Microbiol Lett.

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda,T.et al.: "Identity of hemolysins produced by Baccilus thuringiensis and Bacillus cereus." FEMS Microbiol.Lett.

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 三輪谷 俊夫: "生物トキシン" 学会出版センタ-, 237 (1988)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 三輪谷 俊夫: "腸炎ビブリオ第111集" 近代出版, 362 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda, T., Ni, Y., and Miwatani, T.: "Purification of a TDH-related hemolysin produced by a Kanagawa phenomenon-negative clinical isolate of Vibrio parahaemolyticus 06 : K46." FEMS Microbiol. Lett.57. 241-246 (1989)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Miyake, M., Honda, T., and Miwatani, T.: "Effects of divalent cations and saccharides on Vibrio metschnikovii cytolysin-induced hemolysis of rabbit erythroctyes." Infect. Immun.57. 158-163 (1989)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda, T., Ni, Y., Yoh, M., and Miwatani, T.: "Production of monoclonal antibodies against thermostable direct hemolysin of Vibrio parahaemolyticus and application of the antibodies for enzyme-linked immunosorbent assay." Med. Microbiol. Immunol.178. 245-253 (1989)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sato, M., Arita, M., Honda, T., and Miwatani, T.: "Characterization of a pilus produced by Aeromonas hydrophila." FEMS Microbiol. Lett.59. 325-330 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda, T., Ni, Y., Hori, S., Takakura, H., Tsunasawa, S., Sakiyama, F., and Miwatani, T.: "A mutant hemolysin with lower biological activity produced by a mutant Vibrio parahaemolyticus." FEMS Microbiol. Lett.61. 95-100 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda, T., Ni, Y., Hori, S., Takakura, H., Tsunasawa, S., Sakiyama, F., and Miwatani, T.: "A mutant hemolysin with lower biological activity produced by a mutan Vibrio parahaemolyticus." FEMS Microbiol, Lett.61. 95-100 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoh, M., Honda, T., and Miwatani, T.: "Homogeneity of a hemolysin (Vh-rTDH) produced by clinical and envivonmental isolates of Vibrio hollisae." FEMS Microbiol. Lett.61. 171-176 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishibuchi, M., Taniguchi, T., Misawa, T., Khaemomanee-Iam, V., Honda, T., and Miwatani, T.: "Cloning and nucleotide sequence of the gene (trh) encoding the hemolysin related to the thermostable direct hemolysin of Vibrio parahaemolyticus." Infect. Immun.57. 2691-2697 (1989)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishibuchi, M., Murakami, A., Arita, M., Jikuya, H., Takano, J., Honda, T., and Miwatani, T.: "Detection with synthetic oligonucleotide probes of nucleotide sequence variations in the genes encoding enterotoxins of Escherichia coli." J. Clin. Microbiol.27. 2272-2276 (1989)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda, T., Ni, Y., Yoh, M., and Miwatani, T.: "Evidence of immunologic cross-reactivity between hemolysins of Vibrio hollisae and Vibrio parahaemolyticus demonstrated by monoclonal antibodies." J. Infectious Diseases. 160. 1089-1090 (1989)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoh, M., Honda, T., Miwatani, T., Tsunasawa, S., and Sakiyama, F.: "Comparative amino acid sequence analysis of hemolysins produced by Vibrio hollisae and Vibrio parahaemolyticus." J. Bacteriol.171. 6859-6861 (1989)

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  • [文献書誌] Honda, T., Lertpocasombat, K., Hata, A., Miwatani, T., and Finkelstein, R. A.: "Purification and characterization of a protease produced by Vibrio cholerae non-01 and comparison with a protease of V. cholerae 01." Infect. Immun.57. 2799-2803 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda, T., Wetprasit, N., Arita, M., and Miwatani, T.: "Production and characterization of monoclonal antibodies to a pilus colonization factor (colonization factor antigen III) of human enterotoxigenic Escherichia coli." Infect. Immun.57(11). 3452-3457 (1989)

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  • [文献書誌] Nishibuchi, M., Khaeomanee-iam, V., Honda, T., Kaper, J. B., and Miwatani, T.: "Comparative analysis of the hemolysin genes of Vibrio cholerae non-01, V. mimicus, and VV. hollisae that are similar to the tdh gene of V. parahaemolyticus." FEMS Microbiol. Lett.67. 251-256 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda, T., Ni, Y., and Miwatani, T.: "Production of monoclonal antibody against a hemolysin (Vp-TRH) produced by Vibrio parahaemolyticus." FEMS Microbiol. Lett.68. 167-170 (1990)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Joya, J. E., Tsuji, T., Jacalne, A. V., Arita, M., Tsukamoto, T., Honda, T., and Miwatani, T.: "Demonstration of enterotoxigenic Escherichia coli in diarrheic broiler chicks." Eur. J. Epidemiol.6. 88-90 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Miwatani, T., Honda, T., Higashitsutsumi, M., Tanaka, R., Sakaue, Y., Nakabayashi, T., Igo, J., and Abaidoo, J. R.: "Bacterial etiology of infantile diarrhoea in Papua New Guinea." J. Tropical Pediatrics. 36. 101-103 (1990)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Iida, T., and Yamamoto, K.: "Cloning and expression of two genes encoding highly homologous hemolysins from a Kanagawa-phenomenon-positive Vibrio parahaemolyticus T4750 strain." Gene. 93. 9-15 (1990)

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  • [文献書誌] Yamamoto, K., Ichinose, Y., Shinagawa, H., Makino, K., Nakata, A., Iwanaga, M., Honda, T., and Miatani, T.: "Two-step processing for activation of cytolysin/hemolysin of Vibrio cholerae 01, EI Tor : nucleotide sequence of the structural gene and (hlyA) and characterization of the processed products." Infect. Immun.58(12). 4106-4116 (1990)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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  • [文献書誌] Yamamoto, K., Ichinose, Y., Shinagawa, H., Makino, K., Nakata, A., Iwanaga, M., Honda, T., and Miwatani, T.: "Two-step processing for activation of cytolysin/hemolysin of Vibrio cholerae 01, EI Tor : nucleotide sequence of the structural gene and (hlyA) and characterization of the processed products." Infect. Immun.58(12). 4106-4116 (1990)

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  • [文献書誌] Yoh, M., Hondo, T., Miwatani, T., and Nishibuchi, M.: "Characterization of thermostable direct hemolysin encoded by four representative tdh genes of Vibrio parahaemolyticus." Microbial Pathogenesis.

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  • [文献書誌] Arita, M., Honda, T., Miwatani, T., Ohmori, K., Takao, T., and Shimonishi, Y.: "Purification and characterization of a new heat-stable enterotoxin produced by Vibrio cholerae non-01 serogroup Hakata." FEMS Microbiol. Lett.

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  • [文献書誌] Honda, T., Shiba, A., Seo, S., Yamamoto, J., Matsuyama, J., and Miwatani, T.: "Identity of hemolysins produced by Bacillus thuringiensis and Bacillus cereus." FEMS Microbiol.

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  • [文献書誌] Honda,T.,et al.: "Production and characterization of monoclonal antibodies to a pilus colonization factor (colonization factor antigen III) of human enterotoxigenic <Escherichia>___ー <coli>___ー." Infect.Immun.57. 3452-3457 (1989)

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  • [文献書誌] Honda,T.,et al.: "Characterization of a new thermostable direct hemolysin produced by a Kanagawa phenomenonーnegative clinical isolate of <Vibrio>___ー <parahaemolyticus>___ー." J.Gen.Microbiol.

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      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Honda,T.,et al.: "Production of monoclonal antibody against a hemagglutinin/protease of <Vibrio>___ー <cholerae>___ー nonー01." FEMS Microbiol.Lett.

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      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 三輪谷 俊夫: "ビフィズス2(250頁のうち9頁)" (財)日本ビフィズス菌センタ-, 9 (1989)

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      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 三輪谷 俊夫: "日本内科学会雑誌 79(3)(700頁のうち5頁)" 日本内科学会, 5 (1990)

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      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 三輪谷 俊夫: "感染症学雑誌 64(7)(1262頁のうち7頁)" 感染症学会, 7 (1990)

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      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 三輪谷 俊夫: "腸炎ビブリオ第III集(監修 三輪谷 俊夫,大橋 誠)(362頁のうち8頁)" 近代出版, 8 (1990)

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      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 三輪谷 俊夫: "消化器外科13(6)(1560頁のうち1頁)" へるす出版, 1 (1990)

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      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Honda,T.,Y.Ni,and T.Miwatani: "Purification of a TDH-related hemolysin produced by a kanagawa phenomenon-negative clinical isolate of Vibrio parahaemolyticus" FEMS Microbiol.Lett.,. 57. 241-246 (1989)

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      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Miyake,M.,T.Honda,and T.Miwatani: "Effects of divalent cations and polysaccharides on Vibrio metschinikovii cytolysin-induced hemolysis of rabbit erythrocytes" Infection and Immunity. 57. 158-163 (1989)

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      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Sato,M.,M.Arita,T.Honda,and T.Miwatani: "Characterization of a pilus produced by Aeromonas hydrophila." FEMS Microbiol.Lett.59. 325-330 (1989)

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      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Honda,T.,N.Cakir,M.Arita,and T.Miwatani: "Purification and characterization of the CS2 pili of colonization factor antigen II produced by human enterotoxigenic Escherichia coli" Microbiol.Immunol.33. 265-275 (1989)

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      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Honda,T.,L.Lertocasombat,A.Hata,T.Miwatani,and R.A.Finkelstein: "Purification and partial characterization of a protease produced by Vibrio cholerae non-01" Infection and Immunity. 57. 3452-3457 (1989)

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      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Honda,T.,Y.Ni,M.Yoh,and T.Miwatani: "Production of monoclonal antibodies against thermostable direct hemolysin of Vibrio parahaemolyticus and application of the antibodies for ELISA" Medical Microbiology and Immunology. 178. 245-253 (1989)

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      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Honda,T.,Y.Ni,M.Yoh,and T.Miwatani: "Evidence of immunological cross-reactivity between hemolysins of Vibrio parahaemolyticus and Vibrio hollisae demonstrated by monoclonal antibodies." J.Infect.Dis.160. 1089-1090 (1989)

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      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Honda,T.,Y.Ni,S.Hori,and T.Miwatani: "A mutant hemolysin with lower biological activity produced by a mutant Vibrio parahaemolyticus." FEMS Microbiol.Lett.61. 95-100 (1989)

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      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Nishibuchi,M.,T.Taniguchi,T.Misawa,V.Khaemanee-Iam,T.Honda,and T.Miwatani: "Cloning and nucleotide sequence of the gene(trh)encoding the hemolysin related to the thermostable direct hemolysin of Vibrio parahaemolyticus." Infection and Immunity. 57. 2691-2697 (1989)

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      1989 実績報告書
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  • [文献書誌] Iida,T.,T.Tsuji,T.Honda,T.Miwatani,S.Wakabayashi,K.Wada,and H.Matsubara: "A single amino acid substitution in B subunit of Escherichia coli enterotoxin affects its oligomer formation" Journal of Biological Chemistry. 264. 14065-14070 (1989)

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      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Honda,T.,N.Wetprasit,M.Arita,and T.Miwatani: "Pilus colonization factors of enterotoxigenic Escherichia coli isolated from infantile diarrheal patients in Pupua New Guinea." Am.J.Trop.Med.Hyg.41. 220-223 (1989)

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      1989 実績報告書

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公開日: 1989-04-01   更新日: 2016-04-21  

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