• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 前のページに戻る

細胞増殖におけるプロテインキナ-ゼC群の機能の分子生物学的解析

研究課題

研究課題/領域番号 02262236
研究種目

重点領域研究

配分区分補助金
研究機関横浜市立大学 (1991)
(財)東京都臨床医学総合研究所 (1990)

研究代表者

大野 茂男  横浜市立大学, 医学部・第2生化学, 教授 (10142027)

研究分担者 秋田 朗子  東京都臨床医学総合研究所, 遺伝情報研究部門, 研究員 (40124432)
研究期間 (年度) 1991
研究課題ステータス 完了 (1991年度)
配分額 *注記
10,000千円 (直接経費: 10,000千円)
1990年度: 10,000千円 (直接経費: 10,000千円)
キーワードプロテインキナ-ゼC / PKC関連酵素 / ホルボ-ルエステル / 転写活性化 / PKC阻害剤 / 細胞増殖 / カルシウムイオン / 転写調節 / 蛋白質リン酸化 / 発癌プロモ-タ-
研究概要

昨年度までに確立したcPKCα,βI,βII,γおよびnPKCδ,ε,ηに加え新規θについてもcDNA発現系を確立した。また、各分子種を識別する特異抗体を作成し、種々の組織、細胞での発現を確認した。これらを用いて、各分子種がシグナル伝達系において実際にシグナル伝達素子として機能するか否かを調べるために、ラット繊維芽細胞3Y1にcDNAを導入し、TPA応答性シス因子を介する転写活性化能を指標として各分子種の機能を検定した。その結果上記4種のcPKCに加えて4種のnPKC分子種についても転写活性化能を有すること、すなわち全でがシグナル伝達系において実際にシグナル伝達素子として機能する事が確認された。さらにこの系を用いる事により、種々の活性化因子に対する各分子種の細胞内での活性化の程度を特異的に検出することがはじめて可能となった。種々の活性化因子に対する各分子種の応答性を検討したところ、cPKC群とnPKC群とで大きな差のあることが明かとなった。すなわちTPAは全ての分子種に対して大きな活性化能をもつのに対して、生理的な血清は、予想に反してnPKC群の諸分子を選択的に活性化することが明かとなった。現在血清中の因子の同定を進めている。
一方、nPKCδ,εについてはその精製に始めて成功し、これを用いてそのキナ-ゼ活性の活性化機構を検討した。その結果δがεと同様、いわゆるCaー非依存性のnPKC活性を示すこと、しかしεとは異った基質特異性、活性化因子依存性を示すことを明かにした。また種々のPKC阻害剤がcPKCと同様nPKCδ,εにも作用することを示した。

報告書

(2件)
  • 1991 実績報告書
  • 1990 実績報告書
  • 研究成果

    (20件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (20件)

  • [文献書誌] S.Ohno,Y.Akita,A.Hata,S.Osada,K.Kubo,Y.Konnno,K.Akimoto,K.Mizuno,T.Saido,T.Kuroki and K.Suzuki.: "Structural and functional diversities of a family of signal transducing protein Kinases,protein Kinase C family;two distinct classes of PKC,conventional cPKC and novel nPKC." Advances in Enzyme Regulation,Pergamon Press. 31. 287-303 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] G.Yu,S.Ahmad,A.Aquino,C.R.Fairchild,J.B.Trepel,S.Ohno,K.Suzuki,T.Tsuruo,K.H.Cowan and R.I.Glazer.: "Transfection with protein Kinase C α confers increased multidrug resistance to MCFー7 cells expressing PーGlycoprotein." Cancer Communications. 3. 181-189 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] T.C.Saido,K.Mizuno,Y.Konno,S.Osada,S.Ohno and K.Suzuki.: "Purification and characterization of protein Kinase C ε(nPKC ε)from rabbit brain." Biochemistry. 31. 482-490 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] K.Yamaoka,S.Ohno,H.Kawasaki and K.Suzuki.: "Overexpression of A βーGaractoside binding protein causes transformation of BALB3T3 Fibroblast cells." Biochemical and Biophysical Research Communications. 179. 272-279 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] Y.Konno,Y.Natsumeda,M.Nagai,Y.Yamaji,S.Ohno,K.Suzuki and G.Weber.: "Expression of human IMP dehydrogenase types I and II in escherichia coli and distribution in human normal lymphocytes and leukemic cell lines." The Journal of Biological Chemistry. 266. 506-509 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] K.Mizuno,K.Kubo,T.C.Saido,Y.Akita,S.Osada,T.Kuroki,S.Ohno and K.Suzuki.: "Structure and properties of a ubiquitously expressed protein Kinase C,nPKCδ." Eur.J.Biochemistry. 202. 931-940 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] Y.Niino,S.Ohno and K.Suzuki.: "Positive and negative regulation of the transcription of the human protein Kinase C β gene." The Journal of Biological Chemistry. 267. (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] 水野 恵子,大野 茂男: "バイオシグナル実験法シリ-ズII(蛋白質リン酸化実験法)ープロテインキナ-ゼCアイソザイムの同定" 実験医学. 9(17). 2271-2276 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] 水野 恵子,大野 茂男: "プロテインキナ-ゼCの多様性と細胞情報伝達の制御" 最新医学. 46(9). 1877-1883 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] 大野 茂男,秋田 朗子,羽田 明子,秋本 和憲,水野 恵子,長田 真一,鈴木 紘一: "Protein Kinase Cisozymeと細胞機能" 神経と免疫研究. 4. 14-19 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] 大野 茂男: "がんのバイオサイエンス3(黒木登志夫 編)" 東大出版会, 156 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] 大野 茂男: "Annual Review細胞生物学(矢原一郎、御子柴克彦、月田承一郎 編)" 中外医学社, 395 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] Yoshiko Akita: "Expression and properties of two distirct classes of the phorbor ester receptor family,four conventional protein kinaseC types and a novel protein kinaseC." J.Biol.Chem.265. 354-362 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Shigeo Ohno: "A point mutation at the ATPーbinding site of protein kinaseCα abolishes the kinase activity and renders it downーregulation insenstive:A molecular link between autophosphorylation and downーregulation." J.Biol.Chem.265. 6296-6300 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Yoshiko Akita: "Possible role of Ca^<2+>ーindeperdent protein kinaseC isozyme,nPKCε,in thyrotropinーreleasing hormoneーstimulated signal transduction:differntial downーregulation of nPKCε in GH_4C_1 cells." Biochem.Biophys.Res.Commun.172. 184-189 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Shinーichi Osada: "A phorbol ester receptor/protein kinase,nPKCε,a new member of the protein kinaseC family prodominantly expressed in lung and skin." J.Biol.Chem.265. 22434-22440 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Yasuhiko Kouno: "Expression of human IMP dehydrogenese type I and II in E.coil and distribution in human normal lymphocgtes and leukemic cell lines." J.Biol.Chem.266. 506-509 (1991)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Akiko Hata: "Functional divergence of protein kinaseC family members:PKCγ differs from PKCα,βII,and nPKCε in its competence to mediate 12ー0ーtetradecanoyl phorbol Bーacetateーresporse gene expression."

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 大野 茂男: "代謝(臨増)「先端の医生物学とバイオサイエンス」“情報伝達とプロテインキナ-ゼC"" 中山書店, 475 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Shigeo Ohno: "Advances in Enzyme Redulation(G.Weber Ed.)" Pergamon Press,

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書

URL: 

公開日: 1990-04-01   更新日: 2016-04-21  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi