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生体膜機能分子のリン脂質平面膜法による解析

研究課題

研究課題/領域番号 02304067
研究種目

総合研究(A)

配分区分補助金
研究分野 分子遺伝学・分子生理学
研究機関姫路工業大学 (1991)
自治医科大学 (1990)

研究代表者

平田 肇  姫路工業大学, 理学部, 教授 (40049052)

研究分担者 高木 雅行  大阪大学, 教養部, 助教授 (20028145)
曽我部 正博  名古屋大学, 医学部, 助教授 (10093428)
津田 基之  姫路工業大学, 理学部, 教授 (60045458)
桐野 豊  九州大学, 薬学部, 教授 (10012668)
葛西 道生  大阪大学, 基礎工学部, 教授 (40022595)
研究期間 (年度) 1990 – 1991
研究課題ステータス 完了 (1991年度)
配分額 *注記
12,400千円 (直接経費: 12,400千円)
1991年度: 6,100千円 (直接経費: 6,100千円)
1990年度: 6,300千円 (直接経費: 6,300千円)
キーワードリン脂質平面膜 / イオンチャネル / イオンポンプ / 情報伝達 / 生体膜機能素子 / 合成ペプチド / クライオ電子顕微鏡 / コンピュ-タ-シミュレ-ション / イオンチャンネル
研究概要

本総合研究の本年度の主な成果は次の通りである。
1)シナプス小胞膜に存在するCl^-ーチャネルを平面膜法で解析したところ少なくとも2種類の性質の異なるものが同定された。さらにシナプス小胞とリポソ-ムとの融合活性に蛋白性因子が関与することが示された(曽我部、葛西)。2)ポリエ-テル及び脂肪酸の4級アミン化合物との混合によりK^+イオンに特異性のあるチャネルが形成されることが示された(曽我部)。また、イオンチャネルのモデルとしてグラミシジンや合成ペプチドを用い、それらの化学修飾とイオン透過との関連が詳細に検討された(老木、木下)。3)インフルエンザウィルスの膜融合モチ-フであるペプチドを化学合成し、類縁ペプチドによる膜融合の機序についての解明がなされた(高橋)。4)イオンチャネルの精製法として平面膜法を用い、筋小胞体からK^+チャネル及びCl^-チャネルの精製に成功した(葛西)。5)凍結・融解、脱水・水和、PEG法などにより巨大リポソ-ムを作製し、再構成したイオンチャネルの性質について平面膜法との比較が詳細に検討された(桐野)。6)新たな平面膜法としてpinching oil layer mothodが考案され、再現性のよいイオンチャネル活性測定法が開発された(高木)。7)無脊椎動物(タコ)の視細胞における光情報伝達に関与するロドプシンやGー蛋白質、cGMP依存性カチオンチャネルに関する詳細な解析がなされた(津田、平田)。8)バクテリオロドプシンやH^+ーATPaseなどのイオンポンプを直接挿入法あるいは膜融合ペプチド法など、効率よく平面膜に再構成する方法が開発された(宗行、平田)。9)電子顕微鏡を用いてCl^-チャネルなどの形態が詳しく計測され、イオン透過路などの微細構造に関しての推定が行われた(藤墳)。10)時間分解能クライオ電子顕微鏡技術が考察され、5ミリ秒の時間分解能で蛋白質の構造変化の解析が行われた(徳永)。11)コンピュ-タシミュレ-ションによるリン脂質2分子層膜の中でのリン脂質分子の動きを可視化し、その拡散速度や酸素分子の透過速度の推定が行われた(楠見)。

報告書

(3件)
  • 1991 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1990 実績報告書
  • 研究成果

    (213件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (213件)

  • [文献書誌] S.Oiki: "Bundles of amphipathic transmembrane α-helices as a structural motif for ion-conducting channel proteins:Studies on sodium channels and acetylcholine receptors." Proteins. 8. 226-236 (1990)

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  • [文献書誌] 老木 成稔: "ペプチドによるイオンチャネル機能の再構成:アセチルコリン受容体ポアの構造と機能" 膜. 16. 284-294 (1991)

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  • [文献書誌] T.Takumi: "Alteration of channel activities and gating by mutations of slow Isk potassium channel."" J.Biol.Chem.266. 22192-22198 (1991)

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  • [文献書誌] S.Oiki: "A dipolar amino acid substitution induces voltage-dependent transitions between two stable conductance states in gramicidin channels." Biophys.J.62. (1992)

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  • [文献書誌] Nunogaki,K.: "How to separate the H^+ and OH^- permeanbilities:Kinetics of intravesicular pH change after medium pH jump." J.Theor.Biol.144. 415-427 (1990)

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  • [文献書誌] 葛西 道生: "生体電気信号の発生機構" 学術月報. 43. 124-129 (1990)

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  • [文献書誌] Okihara,K.: "Ca^<2+> and voltage-dependent and calmodulin-antagonist-sensitive anion channel in Chara plasmalemma:A patch clamp study." Plant Cell Physiol.32. 593-601 (1991)

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  • [文献書誌] Ide,T.: "Purification of a Cl^--channel protein of sarcoplasmic reticulum by assaying the channel activity in the planar lipid bilayer system." Biochem.Biophys.Res.Commun.176. 38-44 (1991)

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  • [文献書誌] Ide,T.: "Purification of a K^+-Channel protein of sarcoplasmic reticulum by assaying the channel activity in the planar lipid bilayer system." Biochim.Biophys.Acta.1067. 213-220 (1991)

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  • [文献書誌] 葛西 道生: "筋収縮の制御に関連したイオンチャネル" 麻酔と蘇生. 27. 153-161 (1991)

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  • [文献書誌] M.Higuchi: ""A.Simple Method for the Preparation of an Amphiphilic sequential Polypeptide"," Macromolecules. 23,. 361-365 (1990)

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  • [文献書誌] M.Higuchi: ""Channel Forming Activity of an Amphiphilic Sequential Polypeptide in a Cationic Bilayer Membrane"" Bull.Chem.Soc.Jpn.63,. 1916-1920 (1990)

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  • [文献書誌] M.Higuchi: ""Interaction between L-Glutamic Acid Containing Polypeptide and Cu^<2+> ion on a Bilayer Membrane"," Sen-i Gakkaishi. 49,. 384-390 (1990)

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  • [文献書誌] M.Higuchi: ""Interaction between an Anionic Amphiphilic Sequential Polypeptide and Anionic Bilayer Membrane"," Polymer J.23,. 15-22 (1991)

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  • [文献書誌] Anzai,K.: ""Change in Intravesicular Volume of Liposomes by Freeze-Thawing Treatment as Studied by the ESR Stopped-Flow Technique"" Biochim.Biophys.Acta,. 1021,. 21-26 (1990)

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  • [文献書誌] Nishie,Y.: ""Measurement of Steady-State Ca-Pump Current Caused by Purified Ca-ATPase of Sarcoplasmic Reticulum Incorporated into a Planar Bilayer Lipid Membrane"." J.Biol.Chem.,. 265,. 2488-2491 (1990)

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  • [文献書誌] Anzai,K.: ""Formation of Ion Channels by Synthetic Basic Peptides in Planar Lipid Bilayer Membrane"" Biochim.Biophys.Acta,. 1064,. 256-266 (1991)

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  • [文献書誌] Hirashima,N.: ""Comparative Electrophysiological Study of Reconstituted Membrane Preparations of the Potassium Channel of the Rabbit Skeletal Muscle Sarcoplasmic Reticulum"" Biochim.Biophys.Acta,. 1067,. 235-240 (1991)

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  • [文献書誌] Agawa,Y.: ""Interaction with Phospholipid Bilayers,Ion Channel Formation,and Antimicrobiral Activity of Basic Amphipathic α-Helical Peptide Having Various Chain Length"" J.Biol.Chem.,. 266. 20218-20222 (1991)

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  • [文献書誌] Sokabe,M.: "The structure and dynamics of patch clamped membranes:a study by using differential interference light microscopy." J.Cell Biol.111. 599-606 (1990)

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  • [文献書誌] Nomura,K.: "Aminoglycoside blockade of Ca-activated K channels from rat brain synaptosomal membranes incorporated into planar bilayers." J.Membr.Biol.115. 241-251 (1990)

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  • [文献書誌] Sachs,F.: "Stretch activated ion channels and membrane mechanics." Neurosci.Res.12. s1-4 (1990)

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  • [文献書誌] Fujitsuka,C.: "Intramembrane particles and responses of sensory axon terminals during reinnervation of the frog muscle spindle." J.Neurocytol.19. 175-186 (1990)

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  • [文献書誌] 曽我部 正博: ""筋紡錘では機械的変形をどのように電気信号に変換しているか"" 膜. 8. 121-129 (1990)

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  • [文献書誌] 曽我部 正博: ""マルチ計測顕微鏡を用いた機械受容チャネルの研究"" 聴覚研究会資料. Hー90ー56. 1-6 (1990)

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  • [文献書誌] Sokabe,M.: "Electrophysiological analysis of structural aspects of voltage-dependent SR K channel." Comp.Biochem.Physiol.98C. 23-30 (1991)

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  • [文献書誌] Sokabe,M.: "Quantitative videomicroscopy of patch clamped membranes:stress,strain,capacitance,and stretch channel activation." Biophys.J.59. 722-728 (1991)

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  • [文献書誌] Nomura,K.: "Anion channels from rat brain synaptosomal membranes incorporated into planar bilayers." J.Membr.Biol.124. 53-62 (1991)

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  • [文献書誌] Hashino,E.: "Hair cell damage and recovery following chronic application of kanamycin in the chick cochlea." Hearing Res.52. 356-368 (1991)

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  • [文献書誌] 曽我部 正博: ""神経細胞におけるアナログとデジタル"" Computer Today. 9. 41-43 (1991)

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  • [文献書誌] 曽我部 正博: ""マルチ計測超高倍率顕微鏡の開発"" 比較生理生化学. 8. 22-31 (1991)

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  • [文献書誌] Bowman,C.L.: "Mechanotransducing ion channeles in astrocytes." Brain Res.

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  • [文献書誌] Hashino,E.: "Hair cell regeneration in the adult budgerigar after kanamycin ototoxicity." Hearing Res.

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  • [文献書誌] Sokabe,M.: "Effects of excision and cytochalasin on the viscoelastic properties of patch clamped membranes in heart and skeletal muscle cells." Biophys.J.

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  • [文献書誌] 曽我部 正博: "膜伸展によって活性化されるイオンチャネル" 心臓. 24. 327-337 (1992)

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  • [文献書誌] 曽我部 正博: "Kチャネル" Clinical Neuroscience.

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  • [文献書誌] Takahashi,S.: "Conformation of Membrane Fusion-active 20-Residue Peptides with or without Lipid Bilayers.Implication of α-Helix Formation for Membrane Fusion." Biochemistry. 29. 6257-6264 (1990)

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  • [文献書誌] Murata,M.: "Membrane Fusion Induced by Mutual Interaction of the Two Charge-reversed Amphiphilic Peptides at Neutral pH." J.Biol.Chem.266. 14353-14358 (1991)

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  • [文献書誌] Murata,M.: "Modification of the N-Terminus of Membrane Fusion-active Peptides Blocks the Fusion Activity." Biochem.Biophys.Res.Commun.179. 1050-1055 (1991)

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  • [文献書誌] Murata,M.: "pH-Dependent Membrane Fusion and Vesiculation of Phospholipid Large Unilamellar Vesicles Induced by Amphiphilic and Cationic Pepitides." Biochemistry.

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  • [文献書誌] Pasenkiewicz-Gierula,M.: "Rotational diffusion of a steroid molecule in phosphatidylcholine-cholesterol membranes:fluid phase microimmiscibility in unsaturated-phosphatidylcholine-cholesterol membranes." Biochemistry. 29. 4059-4069 (1990)

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  • [文献書誌] Subczynski,W.K.: "Microimmiscibility and three-dimensional structure of unsaturated phosphatidylcholine-cholesterol membranes:translational diffusion of a square-planar copper complex in membranes." Biochemistry. 29. 7936-7945 (1990)

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  • [文献書誌] Kusumi,A.: "Development of a streak camera-based time-resolved microscope fluorimeter and its application to studies of membrane fusion in single cells." Biochemistry. 30. 6517-6527 (1991)

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  • [文献書誌] Subczynski,W.K.: "Effect of alkyl chain unsaturation and cholesterol intercalation on oxygen transport in membranes:a pulse ESR spin labeling study." Biochemistry. 30. 8578-8590 (1991)

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  • [文献書誌] Pasenkiewicz-Gierula,M.: "Influence of phospholipid unsaturation on the cholesterol distribution in the membrane:a review." Biochimie. 73. 1311-1316 (1991)

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  • [文献書誌] Subczynski,W.K.: "Oxygen transport parameter in rhodopsin as observed by a pulse ESR spin labeling method." Biophys.J.

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  • [文献書誌] Tsuda,M.: "Two Distinct Light Regulated G-proteins in Octpus Photoreceptors." Biochim.Biophys.Acta. 1052. 204-210 (1990)

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  • [文献書誌] Tsuda,M.: "Cyclic Nucleotides and GTP Analogus Stimulated Light induced Phosphoryration of Octopus Rhodopsin." FEBS Lett.254. 38-40 (1990)

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  • [文献書誌] Deng,H.: "Resonance Raman Studies of the HOOP Mode in Octopus Bathorhodopsin with Deuterium Labeled Retinal Chromophores." Biochemistry. 30. 4495-4502 (1991)

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  • [文献書誌] Harada,Y.: "Total Synthesis of a Gene for Octopus Rhodopsin and Its Preliminary Expression." J.Biochem.110. 501-507 (1991)

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  • [文献書誌] Deng,H.: "A Resonance Raman Study of Octopus Bathorhodopsin with Deuterium Labeled Retinal Chromophores." Photochem.Photobiol.54. 1001-1008 (1991)

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  • [文献書誌] M.Tokunaga: "Structure and Structural Change of the Myosin Head." Advances in Biophysics. 27. 157-167 (1991)

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  • [文献書誌] Shinomiya,H.: "Purification and Characterization of the 65-kDa Protein Phosphorylated in Murine Macrophages by Stimulation with Bacterial Lipopolysaccharide." J.Immunol.146. 3617-3625 (1991)

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  • [文献書誌] Ohta,T.: "The "Lysine Cluster" in the N-terminal Region of Na^+/K^+-ATPase α-subunit is not Involved in ATPase Activity." Biochim.Biophys.Acta. 1059. 157-164 (1991)

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  • [文献書誌] Hisabori,T.: "Single site hydrolysis of 2',3'-0-(2,4,6-trinitrophenyl)ATP by F_1-ATPase from a thermophilic bacterium PS3 is accelerated by the chase of excess ATP" J.Biol.Chem.(1992)

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  • [文献書誌] Muneyuki,E.: "Heterogeneous hydrolysis of substoichiometric ATP by the F_1-ATPase from Escherichia coli" Biochim.Biophys.Acta. 1058. 304-311 (1991)

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  • [文献書誌] Odaka,M.: "Aromatic Rings of Tyrosine Residue at Adenine Nucleotide Binding Sites of the β Subunit of F1-ATPase Are Not Necessary for ATPase Activity" Biochem.Biophys.Res.Commun.168. 372-378 (1990)

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  • [文献書誌] 葛西 道生: "生体膜の分子素子・分子機械.生命科学の基礎6.イオン透過とイオノホア." 学会出版センタ-, 25 (1990)

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  • [文献書誌] 谷藤 学: "新生化学実験講座6.生体膜と膜輸送.平面膜法によるチャネル電流の計測." 東京化学同人, (1992)

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  • [文献書誌] 楠見 明弘: "'限界を超える生物顕微鏡'(木下 一彦、宝谷 紘一編)第8章 分子の集まり具合を見る(時間分解蛍光顕微鏡)" 学会出版センタ-, 17 (1991)

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  • [文献書誌] Hashino,E.: ""Noise Induced Hearing Loss"" Mosby-Year Book, 9 (1991)

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  • [文献書誌] 曽我部 正博: ""ブレインサイエンスIV"(佐藤編)"機械刺激感受性イオンチャネルのゲ-ティング機構"" 朝倉書店, 22 (1991)

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  • [文献書誌] Murata,M.: ""Biophysics of the Cell Surface"(Glaser,R.,& Gingell,D.,eds.)Membrane Fusion and Lysis by the Amphiphilic Peptides induced by Charge Neutralization:A Model Study of Virus Membrane Fusion Mechanism." Speinger-Verlag,Berlin, 16 (1990)

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  • [文献書誌] 津田 基之: "生命科学の基礎6『生体膜の分子素子・分子機械』(池上 明編)光情報の認識処理" 学会出版センタ-, 24 (1990)

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  • [文献書誌] Hirata,H.: ""Bioenergetics",(Kim,C.H.and Ozawa,T.,eds.)Reconstitution of H^+-ATPase into Planar Phospholipid Bilayers and its Kinetic Analysis ." Plenum Press,New York, 8 (1990)

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  • [文献書誌] 平田 肇: "「新生化学実験講座第6巻生体膜と膜輸送」平面膜へのFoFlーATPaseの組み込みと解析." 東京化学同人, (1992)

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  • [文献書誌] 平田 肇: "「膜学実験シリ-ズ」アミノ酸キャリア." 共立出版, (1992)

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  • [文献書誌] 平田 肇: "「膜学実験シリ-ズ」平面膜." 共立出版, (1992)

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  • [文献書誌] Oiki, S.: "Bundles of amphipathic transmembrane alpha-helices as a structural motif for ion-conducting channel proteins : Studies on sodium channels and acetylcholine receptors." Proteins. 8. 226-236 (1990)

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  • [文献書誌] Takumi, T.: "Alteration of channel activities and gating by mutations of slow Isk potassium channel." J. Biol. Chem.266. 22192-22198 (1992)

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  • [文献書誌] Oiki, S.: "A dipolar amino acid substitution induces voltage dependent transitions between two stable conductance states in gramicidin channels." Biophys. J.

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  • [文献書誌] Nunogaki, K.: "How to separate the H^+ and OH^- permeabilities : Kinetics of intravesicular pH changes after medium pH jump." J. Theor. Biol.144. 415-427 (1990)

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  • [文献書誌] Okihara, K.: "Ca^<2+> and voltage-dependent and calmodulin-antagonist-sensitive anion channel in Chara plasmalemma : A patch clamp study." Plant Cell Physiol.32. 593-601 (1991)

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  • [文献書誌] Ide, T.: "Purification of a K^+-channel protein of sarcoplasmic reticulum by assaying the channel activity in the planar lipid bilayer system." Biochim. Biophys. Acta. 1067. 213-220 (1991)

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  • [文献書誌] Higuchi, M.: "A simple method for the preparation of an amphiphilic sequential polypeptide." Macromolecules. 23. 361-365 (1990)

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  • [文献書誌] Higuchi, M.: "Channel forming activity of an amphiphilic sequential polypeptide in a cationic bilayer membrane." Bull. Chem. Soc. Jpn.63. 1916-1920 (1990)

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  • [文献書誌] Higuchi, M.: "Interaction between an anionic amphiphilic sequential polypeptide and anionic bilayer membrane." Polymer J.23. 15-22 (1991)

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  • [文献書誌] Anzai, K.: "Change in intravesicular volume of liposomes by freeze-thawing treatment as studied by the ESR stopped-flow technique." Biochim. Biophys. Acta. 1021. 21-26 (1990)

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  • [文献書誌] Nishie, Y.: "Measurement of steady-state Ca-pump current caused by purified Ca-ATPase of sarcoplasmic reticulum incorporated into a planar bilayer lipid membrane." J. Biol. Chem.265. 2488-2491 (1990)

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  • [文献書誌] Anzai, K.: "Formation of ion channels by synthetic basic peptides in planar lipid bilayer membrane." Biochim. Biophys. Acta. 1064. 256-266 (1991)

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  • [文献書誌] Hirashima, N.: "Comparative electrophysiological study of reconstituted membrane preparations of the potassium channel of the rabbit skeletal muscle sarcoplasmic reticulum." Biochim. Biophys. Acta. 1067. 235-240 (1991)

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  • [文献書誌] Agawa, Y.: "Interaction with phospholipid bilayers, ion channel formation, and antimicrobial activity of basic amphipathic alpha-helical peptide having various chain length." J. Biol. Chem.266. 20218-20222 (1991)

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  • [文献書誌] Sokabe, M.: "The structure and dynamics of patch clamped membranes : a study by using differential interference light microscopy." J. Cell Biol.111. 599-606 (1990)

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  • [文献書誌] Nomura, K.: "Aminoglycoside blockade of Ca-activated K channels from rat brain synaptosomal membranes incorporated into planar bilayers." J. Membr. Biol.115. 241-251 (1990)

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  • [文献書誌] Sachs, F.: "Stretch activated ion channels and membrane mechanics." Neurosci. Res.12. S1-4 (1990)

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  • [文献書誌] Fujitsuka, C.: "Intramembrane particles and responses of sensory axon terminals during reinnervation of the frog muscle spindle." J. Neurocytol.19. 175-186 (1990)

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  • [文献書誌] Sokabe, M.: "Quantitative video microscopy of patch clamped membranes : stress. strain, capacitance, and stretch channel activation." Biophys. J.59. 722-728 (1991)

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  • [文献書誌] Nomura, K.: "Anion channels from rat brain synaptosomal membranes incorporated into planar bilayers." J. Membr. Biol.124. 53-62 (1991)

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  • [文献書誌] Bowman, C. L.: "Mechanotransducing ion channels in astrocytes." Brain Res.

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  • [文献書誌] Sokabe, M.: "Effects of excision and cytochalasin on the viscoelastic properties of patch clamped membranes in heart and skeletal muscle cells." Biophys. J.

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  • [文献書誌] Takahashi, S.: "Conformation of membrane fusion-active 20-residue peptides with or without lipid bilayers. Implication of alpha-helix formation for membrane fusion." Biochemistry. 29. 6257-6264 (1990)

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  • [文献書誌] Murata, M.: "Membrane fusion induced by mutual interaction of the two charge-reversed amphiphilic peptides at neutral pH." J. Biol. Chem.266. 14353-14358 (1991)

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  • [文献書誌] Murata, M.: "Modification of the N-terminus of membrane fusion-active peptide blocks the fusion activity." Biochem. Biophys. Res. Commun.179. 1050-1055 (1991)

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  • [文献書誌] Subczynski, W. K.: "Effect of alkyl chain unsaturation and cholesterol intercalation on oxygen transport in membranes : a pulse ESR spin labeling study." Biochemistry. 30. 8578-8590 (1991)

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公開日: 1990-04-01   更新日: 2016-04-21  

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