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マクロファージの構造と機能の分子細胞生物学的解析

研究課題

研究課題/領域番号 02454169
研究種目

一般研究(B)

配分区分補助金
研究分野 実験病理学
研究機関大分医科大学

研究代表者

山本 俊輔  大分医科大学, 医学部, 教授 (90040188)

研究分担者 瀬戸口 美保子  大分医科大学, 医学部, 助手 (20236110)
吉田 盛治  大分医科大学, 医学部, 助手 (70182764)
秋月 真一郎  大分医科大学, 医学部, 助手 (80159334)
樋口 安典  大分医科大学, 医学部, 助教授 (60040284)
研究期間 (年度) 1990 – 1992
研究課題ステータス 完了 (1992年度)
配分額 *注記
5,600千円 (直接経費: 5,600千円)
1992年度: 300千円 (直接経費: 300千円)
1991年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
1990年度: 4,600千円 (直接経費: 4,600千円)
キーワードCD14 / MS2 / osteopontin / cDNA / genome / expression / recombinant / mouse and human / オステオポンチン / マクロファ-ジ遺伝子 / マクロファ-ジcDNA / マクロファ-ジ / 膜蛋白 / 分泌蛋白 / Sppー1
研究概要

1.MS2について:(1).MS2遺伝子の全塩基配列を明かにした(全長14kb、24個のエキソンと23個のイントロン)。MS2遺伝子の転写開始点を明らかにした。(2).転写開始点上流2.5kbの塩基配列を明らかにし、CATアッセイ法でMS2遺伝子のマクロファージ(Mφ)特異的発現に関与するシス配列を明らかにした。(3).MS2の細胞外部が2種類の出血性蛇毒蛋白(コラゲナーゼ活性(MTP)と血小板凝集阻止因子(PAI)型蛋白)と高い相同性をもつことを明らかにした。(4).MTPやPAIドメインおよび細胞膜外部の全構造などに対するリコンビナント(r)MS2蛋白を作成した。抗rMS2抗体を作成した。PAP法でMS2がMφおよび好中球に陽性、リンパ球および肥満細胞に陰性であること、また細胞膜に存在することを確認した。(5).ヒトMS2 cDNAを分離解析し,ヒトrMS2や抗体を作成した。2.CD14について:(1).マウスCD14遺伝子の上流3kbの塩基配列を明かにし、CD14の転写を促進する調節配列と核蛋白を同定した。(2).ヒトCD14遺伝子上流3kbの塩基配列を明らかにし、CAT解析中。(3).rCD14および抗体を作成した。PAP法でCD14がMφおよび好中球に陽性、リンパ球および肥満細胞に陰性であることや、CD14が細胞膜に存在することを確認。(4).抗CD14抗体がLPSによるφのTNFα産生およびショックを抑制することを明らかにした。3.オステオポンチン(OP)について:(1).mOP遺伝子の5 P1' P1'上流3kbを明かにした。(2).ヒトOP(hOP)遺伝子の全構造を明らかにした。(3).OP遺伝子5 P1' P1'領域に単球系細胞で特異的に転写活性を亢進させる領域が存在することを確認した。さらにヒトではこの領域に核蛋白が結合することを確認した。(3).ヒトのrOPを大腸菌系で、マウスのrOPを昆虫系で発現させ、HPLCで精製した。(4).rOPのMφおよびメラノーマ(B16-BL)細胞のハプトタキシス阻止作用をin vitroで確認した。さらに、rOPのB16-BLの肺転移阻止作用を確認した。(5).rOPに対する抗体を作成した。

報告書

(4件)
  • 1992 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1991 実績報告書
  • 1990 実績報告書
  • 研究成果

    (29件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (29件)

  • [文献書誌] Nobuyoshi Nasu: "Molecular and physiological properties of murine CD14" Int Immunol.3. 205-213 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 山本 俊輔: "顆粒球・単球系細胞の高度LPS刺激系-CD14とLPS結合蛋白の遺伝子および蛋白の構造と機能" 免疫91代謝. 28. 131-140 (1991)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 山本 俊輔: "分泌リン蛋白-1(オステオポンチン)-構造と機能および利用について" Bio Industory. 8. 319-327 (1991)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Keiko Matsuura: "Identification of a tissue-specific regulatory element within the murine CD14 gene" J.Biol.Chem.267. 21718-21794 (1992)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 山本 俊輔: "マクロファージ特異分子" 臨床免疫. 24. 1047-1058 (1992)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nasu, N., Yoshida, S., Akizuki, S., Higuchi, Y., Setoguchi, M. and Yamamoto,S: "Molecular and physiological properties of murine CD14." Int. Immunol. 3(2). 205-213 (1991)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yamamoto, S., Setoguchi, M., Matsuura, K. and Higuchi, Y.: "Highly sensitive system for LPS-stimulation in myelomonocytic cells-Structure and function of genes and proteins for CD14 and LPS-binding protein." Metabolism and Disease. 28(12). 131-140 (1991)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yamamoto, S. and Setoguchi, M.: "Secreted phosphoprotein-1(osteopontin)-Structure and function, and its use." Bio Industry. 8(5). 319-327 (1991)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Matsuura, K., Ishida, T., Setoguchi, M., Higuchi, U., Akizuki, S., and Yamamoto, S.: "Identification of a tissue-specific regulatory element within the murine CD14 gene" J. Biol. Chem.267(30). 21718-21794 (1992)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yamamoto, S., Higuchi, Y., Akizuki, S., Yoshiyama, K.: "Macrophage-specific genes." Rinsyome neki. 24(7). 1047-1058 (1992)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nobuyoshi Nasu: "Molecular and physiological properties of murine CD14" Int Immunol.3. 205-213 (1991)

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書
  • [文献書誌] 山本 俊輔: "顆粒球・単球系細胞の高度LPS刺激系ーCD14とLPS結合蛋白の遺伝子および蛋白の構造と機能" 免症91 代謝. 28. 131-140 (1991)

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書
  • [文献書誌] 山本 俊輔: "分泌リン蛋白ー1(オステオポンチン)ー構造と機能および利用について" Bio Industory. 8. 319-327 (1991)

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書
  • [文献書誌] Keiko Matsuura: "Identification of a tissue-specific regulatory element within the murine CD14 gene" J.Biol.Chem. 267. 21718-21794 (1992)

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書
  • [文献書誌] 山本 俊輔: "マクロファージ特異分子" 臨床免疫. 24. 1047-1058 (1992)

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書
  • [文献書誌] Nasu,N.: "Molecular and physiological pro娜erties of murine CD14." Int.Immunol.3. 205-213 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] 山本 俊輔: "分泌リン蛋白ー1(オステオポンチン)構造と機能および利用について" バイオインダストリ-. 5. 319-327 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] 山本 俊輔: "顆粒球・単球系細胞の高感度LPS刺激系CD14とLPS結合蛋白質の遺伝子および蛋白質の構造と機能" 代謝. 131-140 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] Matsuura,K.: "Identification of a tissueーspecific regulatory element within the murine CD14 gene" J.Biol.Chem.

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] Yoshiyama,K.: "Structure of the MS2 gene strongly expressed in murine monocytic lineage A unique transmembrane protein containing cysteinーrich domain" J.Biol.Chem.

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] Higuchi,Y.: "Inhibition of fibronectinーinduced haptotactic migration of murine melanoma B16 by osteopnotin"

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] Matsuura,K.: "Nucleotide and amino acid sequences of the mouse CD14 gene." Nucleic Acids Res.17. 2132 (1989)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Setoguchi,M.: "Mouse and human CD14(myeloid cellーspecific leucineーrich glycoprotein)Primary structure deduced from cDNA clones." Biochim.Biophys.Acta.1008. 213-222 (1989)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Miyazaki,Y.: "Nucleotide sequence of cDNA for mouse osteopontinーlike protein" Nucleic Acids Res.17. 3298-3298 (1989)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Yoshida,S.: "Molecular cloning of cDNA encoding MS2 antigen,a novel cell surface antigen strongly expressed in murine monocytic lineage." Int.Immunol.2. 585-591 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Miyazaki,Y.: "The mouse osteopontin gene Expression in monocytic lineages and complete nucleotide sequence" J.Biol.Chem.265. 14432-14438 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Matsuura,K.: "Letters to the editor." J.Immunol.145. 3150-3150 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Nasu,N.: "Molecular and physiological properties of murine CD14." Int.Immunol.3. 205-213 (1991)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 山本 俊輔: "分泌リン蛋白ー1(オステオポンチン)構造と機能および利用について" バイオインダストリ-. (1991)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書

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公開日: 1990-04-01   更新日: 2016-04-21  

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