| 研究課題/領域番号 |
02454481
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| 研究種目 |
一般研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
物理系薬学
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| 研究機関 | 名古屋市立大学 |
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研究代表者 |
中西 守 名古屋市立大学, 薬学部, 教授 (90090472)
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| 研究分担者 |
鳥越 智香子 名古屋市立大学, 薬学部, 助手 (70237163)
稲垣 健治 名古屋市立大学, 薬学部, 講師 (00080193)
広瀬 順三 福山大学, 工学部, 助教授 (70080215)
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| 研究期間 (年度) |
1990 – 1991
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| 研究課題ステータス |
完了 (1991年度)
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| 配分額 *注記 |
6,100千円 (直接経費: 6,100千円)
1991年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
1990年度: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
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| キーワード | カルシウムイオン / 画像処理 / セカンドメッセンジャ- / 免疫応答 / 共焦点レ-ザ-顕微鏡 / B細胞 / T細胞 / 好塩基球 / 蛍光画像処理法 / カルシウムシグナル / 抗原レセプタ- / 脱感作 / プロテインキナ-ゼC / 共焦点レ-ザ顕微鏡 |
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| 研究概要 |
蛍光画像処理法による免疫応答の研究のため、免疫細胞の情報伝達過程を3次元レベル、リアルタイムで機能解析するシステムの開発を行った。まず、共焦点紫外レ-ザ-顕微鏡を開発し、紫外領域の共焦点蛍光顕微鏡像の測定を可能にした。具体的には、325nmのヘリウム・カドミユウムレ-ザ-を励起光源とする、紫外共焦点レ-ザ-顕微鏡を開発し、免疫細胞内の生化学的反応をミリ秒単位、かつ、3次元レベルで機能解析するシステムの確立に成功した。そして、開発した手法を用いて、免疫細胞(B細胞、T細胞、好塩基球)の抗原刺激に伴う、カルシウムシグナルを単一細胞レベルで機能解析した。その結果、単一のB細胞(Bリンパ球)を用いてカルシウムシグナルの脱感作機構を解明した。次に、B細胞初期分化過程の研究に、画像処理法を適用し、成熟B細胞と未成熟B細胞の間のカルシウムシグナルの伝達様式の差異を解明した。また、未成熟B細胞に特異的に存在する8HS20の遺伝子産物(蛋白質)は、未成熟細胞に特有なカルシウムシグナルの要因ではないことも明らかにした。さらに、好塩基球やリンパ球の抗原刺激に伴うカルシウムシグナルの細胞内の不均一性を明らかにするとともに、抗原刺激にともなうこれらの細胞のカルシウムシグナルが細胞質だけでなく、核にまで伝達されていることを示した。その際、DNAに特異的に結合する蛍光色素を用いて、核のイメ-ジンングを行うことにも成功した。そして、カルシウムイメ-ジングと核のイメジングがよく対応していることを示した。これらの結果は、免疫細胞の抗原刺激の際に、カルシウムイオンが核内のサ-ドメッセンジャ-として働いている可能性を示唆した。
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