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アスパラギン結合型動物糖タンパク質糖鎖の新しい代謝機構の発見、実証、意義づけ

研究課題

研究課題/領域番号 02455022
研究種目

一般研究(B)

配分区分補助金
研究分野 広領域
研究機関昭和大学

研究代表者

井上 貞子  昭和大学, 薬学部, 助教授 (00053827)

研究分担者 岩崎 万理子  昭和大学, 薬学部, 助手 (80054021)
研究期間 (年度) 1990 – 1992
研究課題ステータス 完了 (1992年度)
配分額 *注記
5,900千円 (直接経費: 5,900千円)
1992年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
1991年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
1990年度: 4,600千円 (直接経費: 4,600千円)
キーワードEmbryogenesis / Vitellogenesis / De-N-Glycosylation / Peptide:N-Glycanase / PNGase / Phosvitin / Hyosophorin / Post-Translational Remodification / 動物グリコペプチダ-ゼ / DeーNーglycosylation / Nーグリコシド型糖鎖 / 糖タンパク質代謝 / メダカ卵 / リン酸化糖タンパク質 / 表層胞糖タンパク質 / 動物糖タンパク質糖鎖の遊離 / 魚卵ビテロジェニン / 魚卵ホスビチン糖鎖 / 糖タンパク質糖鎖の代謝機構
研究概要

糖タンパク質は、多細胞生物の営みにとって重要な生体物質の一つである。糖タンパク質の糖鎖の機能を分子レベルで解明するためには、生合成の研究と並んで、代謝の研究が重要であるにも拘らず不充分である。
本研究は、魚卵および魚類初期胚に、局在性と機能の全く異なる糖タンパク質に由来すると思われる糖タンパク質糖鎖が、遊離状態で存在する現象を見出したことに端を発する。これらの遊離糖鎖の構造は、非還元末端部分も、還元末端(ペプチドとの結合部位)もアスパラギン結合型糖鎖として完全なものであることから、遊離糖鎖が単に糖タンパク質の異化産物ではなく、糖タンパク質の機能との関連で脱離したものであることが推測された。また、糖鎖はペプチドとの結合の根元から切断された構造を持つことから、脱離には従来動物細胞においては報告例のないペプチド:N-グリカナーゼ(PNGase)が関与することが推論された。
これらの推論は本研究によって証明され、糖鎖生物学および初期発生細胞生物学分野において重要な、下記の新しい発見がなされた。
(i)動物細胞における最初の例として、ペプチド:N-グリカナーゼ(PNGase)の存在が魚卵で証明された。メダカ胚から、酸性およびアルカリ性PNGaseを単離し、部分精製した。(ii)魚類未受精卵に蓄積される遊離糖鎖の起源がホスビチンであることを、糖鎖の構造解析によって証明した。(iii)メダカ胚の胞胚期から嚢胚期にかけて、表層胞糖タンパク質(hyosophorin)の糖鎖が脱離する現象を見出した。hyosophorinの機能は未解明であるが、この時期に糖鎖が脱離し活性ペプチドが生成することが推測された。
魚卵の系で観察、証明された事象から、PNGaseは動物細胞一般に存在する酵素であり、この酵素によって解媒される糖鎖脱離は、細胞活動の制御機構として存在するタンパク質の再修飾反応であると推論された。

報告書

(4件)
  • 1992 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1991 実績報告書
  • 1990 実績報告書
  • 研究成果

    (18件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (18件)

  • [文献書誌] Inoue Sadako: "De-N-Glycosylation of Glycoproteins in Animal Cells;Evidence for occurrence and significance" Trends in Glycosci.Glycotechnol.2. 225-234 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Seko Akira: "Peptide:N-Glycosidase Activity Found in the Early Embryos of Oryzias latipes (Medaka Fish):The first demonstration of the occurrence of peptide:(-glycosidase in animal cells and its implication for the presence of a de-N-glycosylation system in living organisms" J.Biol.Chem.266. 22110-22114 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Seko Akira: "Identification of Free Glycan Chain Liberated by De-N-Glycosylation of the Cortical Alveolar Glycopolyprotein (Hyosophorin) during Early Embryogenesis of the Medaka Fish,Oryzias latipes" Biochem.Biophys.Res.Commun.180. 1165-1171 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Iwasaki Mariko: "Fish Egg Glycophosphoproteins Have Species-specific N-Linked Glycan Units Previously found in a Storage Pool of Free Glycan Chains" J.Biol.Chem.267. 24287-24296 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sadako Inoue: "De-N-Glycosylation of Glycoproteins in Animal Cells: Evidence for occurrence and significance" Trends in Glycosci. Glycotechnol.2-6. 225-234 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Akira Seko, Ken Kitajima, Yasuo Inoue, and Sadako Inoue: "Peptide:N-Glycosidase Activity Found in the Early Embryos of Oryzias latipes (Medaka Fish). The first demonstration of the occurrence of peptide:N-glycosidase in animal cells and its implication for the presence of a de-N-glycosylation system in living organisms" J.Biol.Chem.266-33. 22110-22114 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Akira Seko, Ken Kitajima, Sadako Inoue, and Yasuo Inoue: "Identification of Free Glycan Chain Liberated by De-N-Glycosylation of the Cortical Alveolar Glycopolyprotein (Hyosophorin) during Early Embryogenesis of the Medaka Fish, Oryzias latipes" Biochem.Biophys.Res.Commun.180-3. 1165-1171 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mariko Iwasaki, Akira Seko, Ken Kitajima, Yasuo Inoue, and Sadako Inoue: "Fish Egg Glycophosphoproteins Have Species-specific N-Linked Glycan Units Previously Found in a Storage Pool of Free Glycan Chains" J.Biol.Chem.267-34. 24287-24296 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1992 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Iwasaki Mariko: "Fish Egg Glycophosphoproteins Hava Species-specific N-Linked Glycan Units Previously Found in a Storage Pool of Free Glycan Chains" J.Biol.Chem.267. 24287-24296 (1992)

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書
  • [文献書誌] Sadako Inoue: "De-N-Glycosylation of Glycoproteins in Animal cells:Evidence for Occurrence and Significance" Trends Giycosci.Glycotechnol.2. 225-234 (1990)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] Akira Seko: "Identification of Fre Glycan Chain Liberated by De-N-Glycosylation of the Cortical Alveolar Glycoprotein (Hyosophorin) during Early Embryogenesis of the Medaka Fish,Oryzias latipes" Biochem.Biophys.Res.Commun.180. 1165-1171 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] Akira Seko: "Peptide:N-Glycosidase Activity Found in the Early Embryos of Oryzias latipes (Medaka Fish)" J.Biol.Chem.266. 22110-22114 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] Mariko Iwasaki: "Glycophosphoproteins Isolated from the Unfertilized Eggs of Different Fish Species Contain Multiantennary N-Linked Glycan Units Previously Found in a Storage Pool of Free Glycan Chains Unique to the Individual Fish Species" J.Biol.Chem.

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] Koji Ishii: "Free Sialooligosaccharides Found in the Unfertilized Eggs of a Freshwater Trout,<Plecoglossus>___ー <altivelis>___ー A Large Storage Pool of ComplexーType Biー,Triー, and Tetraantennary Sialooligosaccharides" J.Biol.Chem.264. 1623-1630 (1989)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Akira Srko: "Structural Studies of Fertilizationーassociated Carbohydrateーrich Glycoproteins(Hyosophorin) Isolated from the Fertilized and Unfertilized Eggs of Flounder,<Paralichthys>___ー <alvaceus>___ー" J.Biol.Chem.264. 15922-15929 (1989)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Sadako Inoue: "Isolation and Structures of Glycoproteinーderived Free Sialooligosaccharides from the Unfertilized Eggs of <Tribolodon>___ー <hakonensis>___ー,a Dace.Intracellular Accumulation of a Novel Class of Biantennary Disialooligosaccharides" J.Biol.Chem.264. 18520-18526 (1989)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Sadako Inoue: "DeーNーGlycosylation of Glycoproteins in Animal Cells:Evidence for Occurrence and Significance" TIGG. 2. 225-234 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Mariko Iwasaki: "Structures of Carbohydrate Chains of Fish Egg Glycophosphoproteins:Implication as Origins of Free Sialooligosaccharides Accumulated in Fish Eggs"

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書

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公開日: 1990-04-01   更新日: 2016-04-21  

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