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唾液腺腺房細胞における蛋白分泌の制御機序(電気生理学的研究)

研究課題

研究課題/領域番号 02670033
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 生理学一般
研究機関東北大学

研究代表者

西山 明徳  東北大学, 医学部, 教授 (90004556)

研究分担者 星宮 望  東北大学, 工学部, 教授 (50005394)
研究期間 (年度) 1990 – 1991
研究課題ステータス 完了 (1991年度)
配分額 *注記
2,400千円 (直接経費: 2,400千円)
1991年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
1990年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
キーワード唾液腺 / 膵外分泌腺 / マスト細胞 / 微小膜容量計測 / 開口分泌 / 蛋白分泌機序 / 電気生理学
研究概要

本年度は昨年度に引き続き、パッチクランプ法による容量計測時間題となる入力部の浮遊容量を補償する方法、膵腺房細胞およびマスト細胞の膜容量計測を行い、唾液腺を含む外分泌腺細胞の膜容量計測法の開発に力点をおき、研究をすすめた。
1.パッチクランプ増幅器の入力浮遊容量補償法の開発:従来のパッチクランプ増幅器では補償回路のオペアンプの周波数特性により補償が適切に行えない。今回ノッチ周波数以降の出力をフィルタ-を挿入して減衰させ、さらに微分回路を挿入して回路帯域を拡げることにより、入力浮遊容量の補償に成功した。
2.膵腺房細胞およびマスト細胞の膜容量計測:(1)ステップ電圧に対する応答電流緩和曲線解析による膜容量の計測:ステップ電圧を加え、西独、リスト社、EPCー7パッチクランプ増幅器の出力電流曲線をNEC社、PCー9801ーPA2パ-ソナルコンピュ-タで処理し、膜コンダクタンスおよび膜容量を計測した。膵腺房細胞ではGTPγSあるいはアセチルコリン刺激によって膜コンダクタンスは1nSより最大40nSまで増加したが、膜容量は20PFより測定誤差範囲(±10%)以上に変化しなかった。マスト細胞では膜コンダクタンスの変化は1nS内であり、膜容量は10PF以上変化した。(2)位相検出器(ロックイン増幅器)を用いた膜容量の計測交流(100Hz)電圧を加え、EPCー7、NF社、LIー754型ロックイン増幅器を用い膜容量電流と膜コンダクタンス電流を測定した。マスト細胞ではGTPSにより10PFの容量増加を示す電流がえられた。しかし、膵腺房では膜コンダクタンス電流が著明に増加し、容量性電流がその影響を受けるため測定不能であった。イオン分泌が活発で、容量変化の小さな外分泌腺腺房細胞では、膜容量変化の測定には膜コンダクタンスをブロックするなどの工夫が必要であると結論された。

報告書

(2件)
  • 1991 実績報告書
  • 1990 実績報告書
  • 研究成果

    (4件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (4件)

  • [文献書誌] 細野 峰照、大庭 茂男、星宮 望、西山 明徳: "生体膜の微小容量計測" 平成3年度電気関係学会東北支部連合大会論文集. 377 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] 細野 峰照、大庭 茂男、星宮 望、西山 明徳: "パッチクランプ回路と位相検出法を用いた微小容量変化測定" 信学技報(MBE91ー67). 91(350). 51-56 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] 大庭 茂男、細野 峰照、星宮 望、泉井 亮、西山 明徳: "パッチクランプ法による単離腺房細胞の膜容量の計測" 日生誌(第24回東北生理談話会抄録). (1992)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] 細野 峰照、大庭 茂男、星宮 望、西山 明徳: "生体膜の微弱容量変化計測ーギガシ-ル時の入力容量補償の検討" 平成2年度電気関係学会東北支部連合大会論文集. 40 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書

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公開日: 1990-04-01   更新日: 2016-04-21  

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