| 研究概要 |
本研究は、最近開発された種々の蛍光物質を用いて、予め細胞体を逆行性に標識し、そのあと別の蛍光色素により細胞内染色を行い二重標識することによって、記録細胞の形態のみならず投射様式を併せて分析するものであり、運動野・体性感覚野・頭頂連合野の皮質構成細胞のより詳細な機能的分類を可能とし、皮質内情報処理機構解明に寄与すると考える。初年度は、主にラットおよびネコでの実験を行ったが、本年度はサルでの実験も加えた。ラット・ネコでの実験は初年度と同じ設定で行い、数鼠の蛍光色素(Fast Blue,Nuclear Yellow,Fluoro Goldなど)を、視床、線条体、橋核、対側皮質などに注入し大脳皮質の第II〜VI層の錐体細胞を逆行性に標識した。一定の生存期間の後、ウレタンまたはネンブタ-ル麻酔下で急性実験を行なった。急性実験は、小脳核、延髄錐体を電気刺激し、大脳質運動野・体性感覚野・頭頂連合野で細胞内記録を行った。記録には、20%Lucifer yellow、5% HRPまたはbiocytinなどの充填ガラス微小電極を用い電気泳動にて記録細胞に注入して皮質各層の細胞や視床核細胞の記録染色を試みた。皮質細胞の染色実験では、細胞数がまだ十分でなく今後例数を増えす必要があるが、発火様式と形態との関連を学会で発表した(Jpn.J.Physiol.1991)。またbiocytinを用いて行った視床での細胞内染色は、膜特性と共に形態学的所見をまとめ学術雑誌に掲載した(Exp.Brain Res.87,1991)。さらにサルの小脳ー視床ー前頭前野投射の視床中継核を、蛍光色素の逆行性標識とHRP順行性標識の組合せで明らかにすることに成功し、学会発表(Neurosci.Res.1991)および学術雑誌へ掲載した(Brain Res.1992 in press)。今後この様な研究を続けることにより、複雑な中枢神経系の線維連絡についてはっきりした結論を導けると考えられる。
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