研究課題/領域番号 |
02670100
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研究種目 |
一般研究(C)
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配分区分 | 補助金 |
研究分野 |
薬理学一般
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研究機関 | 京都薬科大学 |
研究代表者 |
谷口 隆之 京都薬科大学, 薬学部, 教授 (10111957)
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研究期間 (年度) |
1990
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研究課題ステータス |
完了 (1990年度)
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配分額 *注記 |
1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
1990年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
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キーワード | 低酸素負荷 / ラット / protein kinase C / ^3HーPDBu結合実験 / 海馬 / 膜分画 / 細胞質分画 / 核分画 |
研究概要 |
低酸素負荷ラットを長時間飼育し、脳内カルシウム依存性タンパクリン酸化酵素(protein kinase C)の変動を検討した。 ラットを低酸素チャンバ-中で、5%O_2、95%N_2下30分間飼育した後、室内気で飼育し、各時間ごとに大脳皮質、海馬、線状体に別けた。各部位につき、膜分画、細胞質分画、核分画に別け、protein kinaseCの調節部位に結合する ^3Hーphorbolー12,13ーdibutyrate(PDBu)を用いて結合実験を行ない、protein kinase Cの変動を定量的に測定した。 その結果、最も変動の顕著な海馬においては、室内気中に取り出した直後(0分)では、protein kinaseC量に変化は認められなかったが、30分、1時間では膜分画、細胞質分画で減少が認められ、3時間後では元のレべルに回復し、12時間後までは変動が認められなかった。一方、核分画においては、12時間のいずれの時間においても変動は認められなかった。以上の結果より、少なくとも12時間までの早い時期において、海馬のprotein kinase C量は、膜分画、細胞質分画共に一過性に減少し、核分画でのprotein kinase C量に変化がなかったことから、translocationは生じていない可能性が示唆された。現在、1日目、2日目、7日目の変動を検討中であるが、これらの遅い時期でのprotein kinase C量の変動は、早い時期の変動と異なる可能性を示すデ-タが出つつある。また、protein kinase C isozymeの抗体を用いて、Western blottingを行い、早い時期のprotein kinase Cの変動に、どのisozymeがかかわっているのかも現在検討中であり、もうすぐ結論が出ると思われる。
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