βVLDL受容体の精製およびの構造決定

• 研究課題/領域番号: 02670105
• 研究種目: 一般研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 医化学一般
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 村上 元庸 京都大学, 医学部, 助教授 (10157761)
• 研究分担者: 松本 光弘 京都大学, 医学部, 助手 (20229579) ; 長野 豊 京都大学, 医学部, 助手 (80228048)
• 研究期間 (年度): 1990 – 1992
• 研究課題ステータス: 完了 (1992年度)
• 配分額: 2,800千円 (直接経費: 2,800千円); 1992年度: 400千円 (直接経費: 400千円); 1991年度: 500千円 (直接経費: 500千円); 1990年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
• キーワード: β-VLDL / マクロファージ / 線維芽細胞 / ワタナベウサギ / LDL受容体 / B-VLDL / 動脈硬化 / βVLDL / 受容体 / マクロファ-ジ / WHHLウサギ

研究概要

ベータ超低比重リポ蛋白(β・VLDL)は.III型高脂血症患者やコレステロール負荷動物において蓄積することが知られており.マクロファージ(Mφ)に取り込まれてその泡沫化を惹起し.粥状動脈硬化初期巣の形成に寄与することが知られている。家族性高コレステロール血症ホモ接合体のモデル動物であるワタナベウサギは.血清LDLコレステロールが著明に増加しているのみならず,VLDLも増加している。我々は.正常及びワタナベウサギのMφと繊維芽細胞(Fb)におけるβ-VLDLの取り込み機構について検討し.粥状動脈硬化との関連につき解析した。正常及びワタナベウサギ腹腔Mφは.β-VLDLを濃度依存性に取り込み分解し.そのカーブは.飽和曲線を示した。ワタナベウサギMφへの取り込みは.正常と比較してその約30%であった。ワタナベウサギMφは低比重リポ蛋白(LDL)をほとんど取り込まなかった。Fbにおいても.同じ傾向を示した。Mφ及びFbにおいて.β-VLDLの取り込みは.抗LDL受容体抗体を加えることにより.完全に抑制された。これらの結果よりワタナベウサギの腹腔MφとFbにおいては.リガンド結合部位に4アミノ酸欠損した変異LDL受容体がβ-VLDLを取り込むことを示した。抗LDL受容体抗体を用いた免疾沈降実験において.ワタナベウサギMφは.成熟型のLDL受容体を合成することが示された。β-VLDLとワタナベウサギFbの膜分画を用いたリガンドブロッティングにおいては.正常とはぼ同じ大きさの160kDの単一のバンドが検出された。これらの結果より.β-VLDLは.Mφ及びFbにより.変異LDL受容体により正常の約30%程度取り込まれることが明らかとなった。ワタナベウサギのVLDLはβ-VLDL様の性質を持っていることが知られており.Mφの泡沫化に関与して粥状動脈硬化巣の形成に寄与する可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Kenji ISHII: "Characterizaticn of Low Density Lipoprotein Receptdsin Normal and Watamabe Heritablipedemlc Rabbits" Ne Annals of the New York Academy of Soiences. 598. 496-497 (1990)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Kenji Ishii: "Characterization of Low Density Lipoprotein Receptors in Normal and Watanabe Heritable Hyperlipidemic Rabbits" The Annals of the New York Academy of Sciences. 598. 496-495 (1990)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Kita,T.,Ishii,K.,Yokode,M.,Kume,N.,Nagano,Y.,Arai,H.& Kawai,C.: "The role of oxidized low density lipoprotein in the pathogenesis of atherosclerosis." European Heart Journal. 11. 122-127 (1990)
• [文献書誌] Kita,T.,Yokode,M.,Ishii,K.,Arai,H.& Nagano,Y.: "The role of atherogenic low density lipoproteins(LDL) in the pathogenesis of atherosclerosis." Ann.New York Acad.Sci.598. 188-193 (1990)
• [文献書誌] Hara,S.,Nagano,Y.,Sasada,M.& Kita,T.: "Probucol preーtreatment enhances the chemotaxis of mouse peritoneal macrophages." Arteriosclerosis and Thrombosis.
• [文献書誌] Nagano,Y.,Nakamura,T.,Matsuzawa,Y.,Cho,M.,Ueda,Y.& Kita,T.: "Probucol and athrosclerosis in the Watanabe heritable hyperlipidemic rabbitーーlongーterm antiatherogenic effect and effects on established plagues." Atherosclerosis.
• [文献書誌] Nagano,Y.,Arai,H.& Kita,T.: "High density lipoprotein loses its effect to stimulute efflux of cholesterol from foam cells after oxidative modification." Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.88. 6457-6461 (1991)
• [文献書誌] O'Brien,K.,Nagano,Y.,Gown,A.,Kita,T.& Chait,A.: "Probucol treatment affects the cellular composition but not antiーoxidized LDL immunoreactivity of plagues from Watanabe heritable hyperlipidemic rabbits." Arteriosclerosis and Thrombosis. 11. 751-759 (1991)
• [文献書誌] Kita,T.,Ishii,K.,Yokode,M.,Kume,N.,Nagano,Y.,Arai,H.& Kawai,C.: "The Role of oxidized low density lipoprotein in the pathogenesis of atherosclerosis." European Heart Journal. 11(supplE). 122-127 (1990)
• [文献書誌] Kita,T.,Yokode,M.,Ishii,k.,Arai,H.& Nagano,Y.: "The role of atherogenic low density lipoproteins (LDL) in the pathogenesis of atherosclerosis." Annals of the New York Academy of Sciences. 598. 188-193 (1990)
• [文献書誌] Kita,T.,Ishii,K.,Yokode,M.,Kume,N.,Nagano,Y.,Arai,H.,Ueda,Y.& Kawai,C.: "Lipoproteins and atherosclerosis." Japanese Circulation Journal. 54. 1226-1232 (1990)
• [文献書誌] Ishii,K.,Kume,N.,Otani,H.,Kawai,C.,Shimano,H.,Yamada,N.& Kita,T.: "Characterization of low density lipoprotein receptors in normal and Watanabe heritable hperlipidemic rabbits." Annals of the New York Academy of Sciences. 598. 496-497 (1990)
• [文献書誌] Kume,N.,Arai,H.,Nagano,Y.,Otani,H.,Ueda,Y.,Kawai,C.,Ishii,K.& Kita,T.: "Receptors for modified low density lipoproteins on human umbilical vein endothelial cells in culture." Annals of the New York Academy of Sciences. 598. 494-495 (1990)
• [文献書誌] Nagano,Y.,Kume,N.,Otani,H.,Arai,H.,Ueda,Y.,Kawai,C.,Ishii,K.& Kita,T.: "Probucol does not act on lipoprotein metabolism of WHHL rabbit's macrophages." Annals of the New York Academy of Sciences. 598. 530-531 (1990)