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【目的】
2. CRFー結合蛋白(CRFーBP)の内分泌学的検討と純化。
3. Cushing病の病態生理を検討するため、下垂体腺腫細胞のGR mRNAのcharacterizationを行った。
【方法】
1. ラットに両側副賢摘出術を行い、糖質コルチコイド(GC)投与群と非投与群との間で、脳内及び下垂体前葉のPOMC、CRF及びGR mRNAsの変動をNorthern blot法で解析した。
2. CRFーBPのGCによる影響を調べるため、各種内分泌疾患の血中CRFーBP結合能をcrossーlink法で解析した。
3. CRFーBPをaffinity column、HPLC、SDSーPAGEを用いて純化した。
4. Cushing病下垂体腺腫細胞を単層培養した後、GR mRNAを抽出、Northern blot法で解析した。
【結果】
1. 視床下部、下垂体のCRF、POMC、GRの各mRNAは、両側副賢摘出で増加し、GCでdown regulationを示した。
2. CRFーBPレベルは、糖質コルチコイドで減少した。
3. SDSーPAGE上、single bandのCRFーBP fractionが得られた。
4. Cushing病下垂体腺腫細胞のGR mRNAは、視床下部GR mRNAとNorthern blot法による解析で差がなかった。
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