研究課題/領域番号 |
02J08470
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研究種目 |
特別研究員奨励費
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配分区分 | 補助金 |
応募区分 | 国内 |
研究分野 |
基礎獣医学・基礎畜産学
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研究機関 | 東京大学 |
研究代表者 |
上間 匡 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 特別研究員(DC1)
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研究期間 (年度) |
2002 – 2004
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研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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配分額 *注記 |
3,000千円 (直接経費: 3,000千円)
2004年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2003年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2002年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
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キーワード | イヌジステンパーウイルス / 組換えウイルス / ワクチン / Mタンパク |
研究概要 |
ホタル由来のルシフェラーゼ遺伝子を発現する組換えイヌジステンパーウイルス(CDV)を用いて、組換えCDVベクターにおける外来遺伝子発現の制御機構について解析を行った。組み換えCDVベクターでは主に、転写制御配列ではなく、ウイルスゲノム上流に近い位置にある遺伝子ほど遺伝子発現が大きくなるというpolar attenuationより外来遺伝子の発現がコントロールされていることを明らかにした。また、これを利用して組換えCDVベクターにおいて外来遺伝子の発現量をコントロールすることが可能であり、組換えCDVが遺伝子ベクターとして将来利用できることを示した。 新型CDVワクチン候補として、M遺伝子欠損組換えCDVの作出を行った。M蛋白はウイルス粒子形成・出芽に重要とされ、M遺伝子に欠損や変異を持つウイルスは感染細胞からの正常なウイルス粒子の放出がないことが他のウイルスで知られている。人為的にM遺伝子を欠損したウイルスは感染細胞からウイルスが排出されないために高い安全性が期待され、新しいワクチン候補として有用であると考えられ、CDV国内分離株を基に、M遺伝子を欠損させ、かわりに蛍光蛋白EGFP遺伝子を挿入したM遺伝子欠損組換えCDVを作出した。観察により組換えCDVは細胞間を直接伝播していると考えられ、ウイルス放出のない新たな組換え生ワクチン候補として有用と考えられた。また、EGFPにより可視化されたウイルスは、細胞、動物への感染後の追跡が可能であり、今後の基礎研究に有用なツールになると期待できる。
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