研究課題/領域番号 |
03252205
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研究種目 |
重点領域研究
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配分区分 | 補助金 |
研究機関 | 大阪大学 |
研究代表者 |
杉山 治夫 大阪大学, 医学部・第3内科, 助手 (70162906)
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研究期間 (年度) |
1991
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研究課題ステータス |
完了 (1991年度)
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配分額 *注記 |
2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
1991年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
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キーワード | Stem cell line / Abelsonマウス白血病ウイルス / Dexture culture |
研究概要 |
我々が分離したAbelsonマウス白血病ウイルスの温度感受性変異株(tsmutant)でトランスフォ-ムした未熟B細胞株では、許容温度(35℃)では、増殖するのみであるが、非許容温度(39℃)に培養温度を上げると、細胞が、transformedの状態から、untransformedの状態に変わり、このため分化が一斉にはじまり、まず1g遺伝子の再構成がおこり、次に、T細胞レセプタ-遺伝子の再構成も起こる。さらに細胞表面には、Thyー1抗原が一過性に出現したり、RA3ー6B2モノクロ-ナル抗体で検出されるB220抗原も、cyclicに発現した。このようなデ-タから、血球系細胞の分化研究に対する、Abelsonウイルスのts mutantの有用性が確立された。そこで、このts mutantを用いて、血球系のより未熟な細胞をトランスフォ-ムさせ、stem cell lineを樹立し、stem cellの分化を、培養温度でコントロ-ルし、その分化機構を解明しようとするのが本研究である。現時点での研究状況は次のようである。1.マウスの骨髄細胞からDexture cultureを作製した。一方、ts vーabl geneを挿入したpZip・neoーtsーvーabl retroviral vectorやLTRをMPSVにかえたvectorを作製した。これらのretroviral vectorを、Dexture cultureに感染させ、トランスフォ-ムし株細胞の樹立を試みているが、今のところ、stem cell lineの樹立には成功していない。2.上記のretroviral vectorを正常マウスの骨髄細胞に感染させ、致死的に放射線照射したマウスに骨髄移植を行ない、白血病化を試み、これから、stem cell line樹立を目ざしている。
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