| 研究概要 |
代表的な転写制御蛋白質と転写酵素RNAポリメラ-ゼの機能構造について、生化学的、分子遺伝学的、構造化学的ならびに合成化学的研究を初年度にひきつづき展開し、以下の成果を得た。
(1)大腸菌CRPのポジティブコントロ-ル変異体(DNAに結合するが転写促進活性を失ったもの)を数種単離し,変異部位の同定および精製タンパクの生化学的特質を明らかにした。
(2)CRPとRNAポリメラ-ゼがDNAヘリックスの同じ側に結合することがCRPの転写活性化にとって重要であることを証明した。
(3)大腸菌の適応的応答に関与するAda蛋白とリン酸レギュロンの制御蛋白質PhoBのDNA結合ドメイン,メチル化またはリン酸化ドメイン,転写活性化ドメインを明らかにした。
(4)大腸菌RNAポルメラ-ゼのαサブユニットのC末側に転写因子(CRP,OmpR,phoB,Ada,その他)と相互作用し転写因子依存性プロモ-タ-からの転写に関与する機能域があることを明らかにした。
(5)ラムダファ-ジCro蛋白質,酵母の転写制御因子(GAL4,Pap1,Pho4)に関し,DNAとの相互に作用により誘起される蛋白質およびDNAの構造変化を明らかにした。
(6)cーMybおよびHu型DNA結合蛋白質HBsのDNA結合ドメインを化学合成した。このペプチドを用いて,第一班の西村はDNA結合ドメインの溶液内構造をNMR等により解明した。
|
