| 研究課題/領域番号 |
03454068
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| 研究種目 |
一般研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
製造化学・食品
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
中村 良 名古屋大学, 農学部, 教授 (70023398)
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| 研究分担者 |
安達 貴弘 名古屋大学, 農学部, 助手 (50222625)
松田 幹 名古屋大学, 農学部, 助教授 (20144131)
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| 研究期間 (年度) |
1991 – 1992
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| 研究課題ステータス |
完了 (1992年度)
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| 配分額 *注記 |
5,200千円 (直接経費: 5,200千円)
1992年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
1991年度: 4,200千円 (直接経費: 4,200千円)
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| キーワード | コメアレルゲン蛋白質 / アンチセンスRNA法 / イネゲノム遺伝子 / トランスジェニックイネ / 米アレルゲン蛋白質 / 遺伝子 / シスエレメント / 転写調節領域 / ゲノムDNA |
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| 研究概要 |
本申請者はこれまでにコメに含まれる主要アレルゲン蛋白質を単離し、その性質を明らかにすると共に、アレルゲン蛋白質のcDNAクローンをプローブとしてイネゲノム遺伝子の解析を行ってきた。本年度はこれまでに行ってきたコメアレルゲン蛋白質遺伝子の構造解析に基づいて、アンチセンスRNA法によるイネ種子におけるアレルゲン蛋白質発現抑制を試み、実験室的規模では成功の可能性が認められたので、その内容を報告する。
実験は、すでに得れらているコメアレルゲン蛋白質のcDNAを、3種のプロモーター(コメアレルゲン蛋白質プロモーター、イネプロラミンプロモーターおよびカリフォルニア・モザイクビールス35Sプロモーター)に逆向きに連結した遺伝子を作製し、イネプロトプラストへ直接導入した。再分化したトランスジェニックイネの種子におけるアレルゲン蛋白質の量は、SDS-PAGEおよびウエスタンブロッティングにより解析した。その結果、アレルゲン蛋白質以外の主要貯蔵蛋白質であるグルテリン、プロラミンに関しては全く減少は認められなかった。しかし、幾つかのトランスジェニックイネの種子では、アレルゲン蛋白質含量が明らかに減少していることが確かめられた。このことは、アンチセンスRNA法によるアレルゲン蛋白質の発現抑制が十分に可能であることを示すものである。今後閉鎖系圃場での実験を行い、開放系圃場への実験に移して実用化に向けて研究を発展させる予定である。
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