| 研究課題/領域番号 |
03454088
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| 研究種目 |
一般研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
水産化学
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
伏谷 伸宏 東京大学, 農学部, 教授 (70012010)
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| 研究分担者 |
松永 茂樹 東京大学, 農学部, 助手 (60183951)
廣田 洋 東京大学, 理学部, 助手 (00126153)
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| 研究期間 (年度) |
1991 – 1992
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| 研究課題ステータス |
完了 (1992年度)
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| 配分額 *注記 |
6,500千円 (直接経費: 6,500千円)
1992年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
1991年度: 5,000千円 (直接経費: 5,000千円)
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| キーワード | 海洋無脊椎動物 / 酵素阻害 / トロンビン / トリプシン / セリンプロテアーゼ / 海綿 / Nazumamide A / Toxadocial A / 海綿動物 / toxadocial A / 硫酸コステル / セリンプロテア-ゼ / nazumomide A / テトラペプチド |
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| 研究概要 |
伊豆半島、伊豆諸島、九州沿岸および四国沿岸で海綿動物273検体、腔腸動物32検体、外肛動物7検体および原索動物26検体を採集した。各検体の熱メタノール抽出物をクロロホルムと水で分配し、脂溶性および水溶性画分を調製した。それぞれの画分についてトロンビン、トリプシンなどのセリンプロテアーゼに対する阻害活性を常法により調べた。その結果、海綿動物45検体、腔腸動物5検体および原索動物5検体に活性が認められた。なお活性は水溶性画分に多く認められたが、脂溶性画分にも活性を示すものがあった。
そこでまず、上記スクリーニングで水溶性画分が強い活性を示した八丈島産海綿Theonella sp.から活性物質の単離と構造決定を試み、トロンビンをIC_<50>2.8μg/mLで阻害する活性物質を得た。Nazumamide Aと命名したこの物質の構造は、アミノ酸分析およびNMR等のスペクトル分析から、N-末端に2,5-ジヒドロキシ安息香酸が結合した特異なテトラペプチド(1)と決定した。
つぎに、八丈島産海綿Toxadocia cylindricaから活性物質の単離と構造の解析を試み、IC_<50>6.5μg/mLでトロンビンを特異的に阻害する活性成分を得ることができた。Toxadocial Aと命名したこの物質の構造は、長いメチレン鎖の繰り返し構造を持つため、NMRの解析のみでは構造を明らかにできなかった。そこで加水分解後、ジラール試薬PおよびTの誘導体に導き、FAB MS/MS分析して、全構造を2のように決定した。
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