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樹立胎仔肝細胞株を用いた胎仔肝における造血機能の解析

研究課題

研究課題/領域番号 03454114
研究種目

一般研究(B)

配分区分補助金
研究分野 解剖学一般
研究機関東北大学

研究代表者

伊藤 恒敏  東北大学, 医学部, 教授 (90004746)

研究期間 (年度) 1991 – 1992
研究課題ステータス 完了 (1992年度)
配分額 *注記
1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
1992年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
キーワード肝 / 胎仔肝 / 肝細胞 / 造血 / 微小環境 / 支質細胞 / コロニー増殖因子 / 細胞間相互作用 / 胎生肝 / 上皮細胞 / 造血支持機能 / 造血前駆細胞 / MーCSF / GMーCSF
研究概要

胎生肝は胎生時代における重要な造血器官である。その機構を明らかにするために我々は胎生15日のBALB/cマウスの肝臓から上皮細胞クローン(FHC-4D2)を樹立し、その株細胞が持つ造血支持機能の解析を行った。昨年度の報告では4D2は骨髄細胞に対しても胎仔肝造血細胞に対しても増殖促進作用を示し、その働きは4D2の分泌するCSF活性によること、それらはM-CSF及びGM-CSFであることがわかった。
さらに、4D2はその単層培養上で骨髄造血細胞を12週間、外来性の造血コロニー増殖因子のない状態で維持した。2週間以上の培養では造血細胞との直接の接触が必要だった。4D2は5-FU投与マウスの骨髄細胞も維持した。Limiting dilution analysisでは4D2が未熟な前駆細胞をGM-CFCまで分化させることがわかった。一方、4D2単層培養上にマウス胎仔胸腺リンパ球をのせヒトrlL-2を100U/mlを加えた状態で培養すると、約2週間で胎仔胸腺リンパ球が増殖し、増殖してきたリンパ球はThy1陽性で、ほぼ10%がCD3に染色された。CD3陽性のうち、ほとんどがTCRγδ型で、Vγ5を発現しており、大半がCD8ααのタイプで細胞障害活性が認められた。また、4D2はBリンパ球に対しても支持作用を発揮したが、表面に免疫グロブリンを発現しない未熟なBリンパ球が産生され、肝細胞株のみではそれ以上には分化が進まなかった。それらをWhitlock-Witteの培養に移すと表面に免疫グロブリンを発現するまでになった。
本年度での研究で、長期培養系では4D2と前駆細胞の細胞間相互作用(接触)によって造血細胞が支持されることが明かとなった。さらに解析の結果、造血支持作用に加えて胎仔型Tリンパ球および熟なBリンパ球の増殖作用も持つことが証明された。

報告書

(3件)
  • 1992 実績報告書
  • 1991 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 研究成果

    (13件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (13件)

  • [文献書誌] Hata,M.,Nanno,Doi,H.,Satomi,S.,Sakata,T.,Suzuki,R.,and Itoh,T.: "Establishment of a hepatocytic epithelial cell line from the murine fetal liver capable of promoting hemopoietic cell proliferation" J.Cell.Physiol. 154. 381-392 (1993)

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書
  • [文献書誌] 伊藤 恒敏、畠 雅弘、土井 秀之、鈴木 隆二、坂田 恒昭、里見 進、南野 昌信: "胎仔肝上皮細胞株によるγδ型T細胞の誘導" Minophagen Medical Review,Supplement. (1993)

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書
  • [文献書誌] Hata,M.,Nanno,M.,Doi,H.,Satomi,S.,Sakata,T.,Suzuki,R.,and Itoh,T.: "Establishment of a hepatocytic epithelial cell line from the murine fetal liver capable of promoting hemopoietic cell proliferation." J.Cell.Physiol.154. 381-392 (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1991 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nanno,M.,Hata,M.,Doi,H.,Satomi.S.,Sakata,T.,Suzuki.R.,and Itoh,T.: "Induction or cytolytic TCRγδ^+ cells from fetal thymocytes in co-culture with a fetal hepatocyte clone in the presence of 1L-2." J.Immunol.(1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1991 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nanno,M.,Hata,M.,Doi.H.,Satomi,S.,Sakata,T.,Suzuki,R.,and Itoh,T.: "Stimulation of in vitro hematopoiesis by murine fetal liver-derived epithelial cell clone through cell-cell contact." (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1991 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nanno,M.,Hata,M.,Doi,H.,Satomi,S.,Sakata,T.,Suzuki,R.,and Itoh,T.: "Generation and maintenance of surface immunoglobulin negative B cells from the bone marrow and the fetal liver cells in coculture with a fetal hepatocyte clone,FHC-4D2." (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1991 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nanno,M.,Hata,M.,Doi,H.,Satomi,S.,Sakata,T.,Suzuki,R.,and Itoh,T.: "Hemopoietic capacity of murine fetal liver-derived epithelial clone." (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1991 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 伊藤 恒敏、畠 雅弘、土井 秀之、鈴木 隆二、坂田 恒昭、里見 進、南野 昌信: "胎仔肝上皮細胞株によるγδ型T細胞の誘導" Minophagen Medical Review,Supplement. (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1991 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hata,M.,Nanno,M.,Doi,H.,Satomi,S.,Sakata,T.,Suzuki,R.,and Itoh,T.: "Establishment of a hepatocytic epithelial cell line from the murine fetal liver capable of promoting hemopoietic cell proliferation." J.Cell.Physiol.154. 381-392 (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1991 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nanno,M.,Hata,M.,Doi,H.,Satomi,S.,Sakata,T.,Suzuki,R.,and Itoh,T.: "Induction of cytolytic TCRgammadelta+ cells from fetal thymocytes in co-culture with a fetal hepatocyte clone in the presence of IL-2." (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1991 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nanno,M.,Hata,M.,Doi,H.,Satomi,S.,Sakata,T.,Suzuki,R.,and Itoh,T.: "Stimulation of in vitro hematopoiesis by murine fetal liver-derived epithelial cell clone through cell-cell contact." (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1991 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nanno,M.,Hata,M.,Doi,H.,Satomi,S.,Sakata,T.,Suzuki,R.,and Itoh,T.: "Generation and maintenance of surface immunoglobulin negative B cells from the bone marrow and the fetal liver cells in coculture with a fetal hepatocyte clone, FHC-4D2." (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1991 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nanno,M.,Hata,M.,Doi,H.,Satomi,S.,Sakata,T.,Suzuki,R.,and Itoh,T.: "Hemopoietic capacity of murine fetal liver-derived epithelial clone." (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1991 研究成果報告書概要

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公開日: 1992-04-01   更新日: 2017-05-19  

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