| 研究課題/領域番号 |
03454162
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| 研究種目 |
一般研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
病態医化学
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| 研究機関 | 徳島大学 |
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研究代表者 |
木戸 博 徳島大学, 酵素科学研究センター, 助教授 (50144978)
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| 研究分担者 |
大下 健幸 徳島大学, 酵素科学研究センター, 助手 (30185243)
勝沼 信彦 徳島大学, 酵素科学研究センター, 教授 (50035375)
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| 研究期間 (年度) |
1991 – 1992
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| 研究課題ステータス |
完了 (1992年度)
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| 配分額 *注記 |
6,100千円 (直接経費: 6,100千円)
1992年度: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
1991年度: 3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
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| キーワード | レトロウイルス / エイズ / プロセシングプロテアーゼ / 外膜蛋白前駆体 / セリンプロテアーゼ / gp160 / プロセシングプロテア-ゼ / セリンプロテア-ゼ |
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| 研究概要 |
癌ウイルス,エイズウイルスを始めとするレトロウイルスの外膜糠蛋白は、いずれもリボソームで前駆体として合成された後、宿主細胞のゴルジ膜で限定分解を受け小胞体-ゴルジ装置系を通って細胞膜へ選択的に運ばれることが知られている。この限定分解が阻止さめると、ウイルスは不完全ウイルスとなり感染性を失う。我々はCD4陽性人Tリンパ球の膜分画より、ゴルジ膜あるいはERに局在するHIV-1の外膜蛋白前駆体活性化プロテアーゼの精製に成功した。本酵素は、HIV-1外膜蛋白前駆体gp160をgp120gとgp41に変換する分子量26kDaのトリプシン型セリン性プロテアーゼで、活性基のセリンを持つ。本酵素はgp160を基質にすると、pH6.5-7.5に至適pHを示した。本酵素はgp160のシークエンスの中で、-Arg^<508>Leu1-Lys-Arg^<511>-を特異的認識してArg^<511>の後を選択的に切断した。この切断部位のシークエンス-Arg(Lys)-X-Arg(Lys)-Argは、殆ど全てのレトロウイルス外膜糠蛋白前駆体の切断部位に認められる共通構造である。本酵素の活性は、人やマウスのT細胞以外に、B細胞、単球、HeLa細胞、血管内皮細胞に認められ種々のレトロウイルスの感染に関与していると思われる。本酵素の欠損した人マクロファージ培養細胞U2ME7ではHIVの外膜蛋白gp1分解されずER,ゴルジに蓄積される。本酵素は、これまでに報告のあったDibasicの基質を特異的に分解するKEX2ファミリープロテアーゼと異なり、金属非要球性でEDTAは活性に影響を与えない。また本酵素の活性は、DFP,アプロチニンなどのトリプシンインヒビターとDTT,システインなどのSH試薬により抑制され、これらの中でも特に低分子インヒビターが培養細胞レベルでも有効であり抗HIV活性を示すことが明らかとなった。
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