| 研究課題/領域番号 |
03556012
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| 研究種目 |
試験研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
応用微生物学・発酵学
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
小林 猛 名古屋大学, 工学部, 教授 (10043324)
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| 研究分担者 |
木村 達郎 アイシン精機(株), 研究員
魚住 信之 名古屋大学, 工学部, 助手 (40223515)
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| 研究期間 (年度) |
1991 – 1992
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| 研究課題ステータス |
完了 (1992年度)
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| 配分額 *注記 |
7,700千円 (直接経費: 7,700千円)
1992年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
1991年度: 5,500千円 (直接経費: 5,500千円)
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| キーワード | 人工種子 / 毛状根 / 再分化 / 不定芽 / アグロバクテリウムリゾゲネス / 西洋わさび / 植物ホルモン / 不定芽原基 / オ-キシン / 大量培養 |
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| 研究概要 |
1オーキシンを培地に添加することにより、西洋わさび毛状根の増殖速度および到達細胞重量を増大させることができた。そしてインドール酢酸(NAA)1mg/Lを添加した反復回分培養により、培養40日目で57g-d.c./Lの高密度に達した。さらに増殖特性のモデル化をおこない、実験値と優れた一致を得た。
2切断した毛状根2%アルギン酸カルシウムゲルによりビーズ状に固定化した。5.0mm以上必要であり、成長点、分枝を含んだ部位がこれらを含まなかった部位に比べて高かった。毛状根はオーキシンを添加した培養すると分枝の数が増大し高い再分化効率が得られた。大量培養に有利な液体培養でNAA無添加からNAAを添加する2段階培養を行ったところ、NAA0.1mg/1で最も発芽が促進され健全な小植物体に生長した。
3毛状根を暗所において液体培養すると不定芽原基が形成される。30日間液体培養して形成された不定芽原基はほぼ100%発芽体へ分化した。
4バイオリアクターを用いた場合にも効率的に分化が進むことがわかった。不定芽の植物体形成効率はその大きさに依存し、高い効率を得るためには最適な大きさの範囲が存在する。不定芽形成段階でサイトカイニンを添加することにより毛状根の伸長を制抑し、不定芽の大きさを制御できることが分った。
5通常多芽化する西洋わさび毛状根不定芽を、ブレンダーによる機械的処理により単芽に分割することに成功した。得られた不定芽は30日で90%以上が正常に成長した。不定芽をデシケーション処理したところ、最大で15日で97%の植物体形成効率が得られた。以上の結果は、毛状根が人工種子の内封物として応用できることを示している。
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