| 研究課題/領域番号 |
03670053
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
神経・筋肉生理学
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
鈴江 俊彦 東京医科歯科大学, 医学部, 助手 (40143565)
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| 研究期間 (年度) |
1991 – 1992
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| 研究課題ステータス |
完了 (1992年度)
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| 配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1992年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
1991年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
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| キーワード | 神経回路網 / ラット / 発生 / 哺乳類 / 培養 / 蛍光色素 / 胎仔 / モノクローナル抗体 / 全胚培養 / モノクロ-ナル抗体 |
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| 研究概要 |
本研究においては、哺乳類胎仔の神経回路網形成の機序を解析するために、最近私達の教室で開発した妊娠後期ラット胎仔in vitro経胎盤潅流法を、胎仔ニューロンの形態観察に応用する研究を進めた。先ず、順行性にニューロンを蛍光ラベルすること試みた。ラット胎仔を経胎盤的に潅流し、蛍光色素Dilの結晶を、胎仔の脊髄あるいは後根神経節に挿入し、in vitroで約15時間生存されることにより、運動ニューロン、知覚神経ニューロン、あるいは交感神経節前ニューロンの神経線維の末梢の部分を生きたまま明るく染色することが可能であることが明らかになった。次にニューロンを逆行性にラベルする方法を試みた。経胎盤的に潅流したラット胎仔の助間神経などの末梢神経の部分に、Dilの小結晶を挿入し、10-20時間潅流すると、末梢から取り込まれた色素が細胞体に移行し、後根神経節、運動ニューロン、また挿入部位によって、脊髄内の交感神経節前ニューロンの細胞体が蛍光ラベルされることが、明らかになった。また、経胎盤的に20時間程度潅流した胎仔から、大脳、中脳、脊髄、後根神経節を取り出して、単離培養を行ったところ、どの組織を用いても良好な培養を得ることが出来た。この両者を組み合わせて、逆行性にラベルした特定のニューロンを、培養することが可能になった。逆行性にラベルすることは、脊髄のほか、大脳、中脳等、中枢神経系のほとんどの部分で可能であることも明らかになった。このことは、これまで不可能であった胎仔の中枢神経系の多種類のニューロンを、それぞれ区別して培養できることを意味しており、このニューロンを逆行性にラベルする方法は画期的であるといえる。胎仔ニューロンを順行性、逆行性にラベルする新しい方法を用いて、ニューロンの挙動を詳しく解析することにより、神経回路網形成の機構の詳細についての研究が、今後さら進展することが期待される。
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