研究課題/領域番号 |
03670383
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研究種目 |
一般研究(C)
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配分区分 | 補助金 |
研究分野 |
消化器内科学
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研究機関 | 東京慈恵会医科大学 |
研究代表者 |
青山 南圭 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助手 (60231106)
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研究分担者 |
宮崎 寛 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助手 (70192367)
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研究期間 (年度) |
1991 – 1992
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研究課題ステータス |
完了 (1992年度)
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配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1992年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
1991年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
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キーワード | コレステロール結石 / 抑制因子 / 促進因子 / cholesterol nucleation / Con A lectin / Helix pomatia lectin / 糖蛋白 / Helix pomatia lectia / コレステロ-ル結石形成抑制因子 / コレステロ-ル結石形成促進因子 / 糖タンパク / Cholesterol Nucleation / Cou A lectin / HPLC |
研究概要 |
コレステロール胆石症の治療に関しては近年、胆汁酸による溶解療法、超音波衝撃破砕療法など目覚しく進歩しているが、その成因機序に関しては論議の的であり未だ確立されていない。欧米の諸施設から胆汁中にコレステロール結晶の形成(Nucleation)と成長(Growth)を促進あるいは抑制するglycoproteinsの存在が報告されている。我々は、それら因子の胆汁中の量的バランスが、コレステロール結石の誕生に大きな役割を果たしていると考えてきた。そこで、胆汁中に形成されるコレステロール結晶を分光光度計を使用して半定量的に測定するcholesterol nucleation&growth asssay法とゲル濾過法、レクチン・アフィニティー・クロマトグラフィー(Concanavalin A、Helix pomatia)、高速液体クロマトグラフィー等の諸蛋白分離法を組み合わせて、胆石患者と正常人胆汁を用いてコレステロール結晶の形成促進因子と抑制因子の分離精製を試みた。その結果、コレステロール結晶形成促進作用を有するヒト胆汁中糖蛋白はCon A lectin結合蛋白分画中に多く存在し、一方、抑制作用を有する糖蛋白はHelix pomatia lectin結合蛋白分画中に多く存在することがコレステロール結晶を分光光度計を用いて半定量的に測定するcholesterol nucleation&growth asssay法で確認された。現在、それぞれの糖蛋白分画をイオン交換とゲル濾過カラムを用いた高速液体クロマトグラフィーで分離精製している。コレステロール結晶形成促進作用を有する糖蛋白分画に関してはSDS-PAGE電気泳動上4つの蛋白バンドまで分離された。現在、これら糖蛋白のさらなる分離精製とmonoclonal antibodyの作成を試みている。
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