| 研究概要 |
1モルモット心筋細胞を単離し,蛍光色素法による細胞内カルシウムイオン(Ca)濃度変化の記録と同時に,微小電極により,細胞内電位を安定して記録できる方法を確立した.
2はじめに,心筋細胞を心外膜側,心内膜側から別個に採取し,収縮中のCa増加(Caトランジェント,以下CaT)の持続時間を測定した.結果は,細胞毎の差異が非常に大きく,心室壁内層,外層の差による,トランジェント持続時間に有意の差を見いだせなかった.そこで,標本毎の持続時間の差を規定している因子を検討するため,心筋細胞の収縮様式を観察した.その結果,電気刺激による収縮に引き続いて後収縮(遅延後電位)を示す細胞群は,示さない細胞群に比し,静止期のCa濃度は高く,トランジエントの持続時間は小であった.即ち,CaTの持続時間を検討するためには,静止期のCa濃度が等しく,また後収縮を示さない細胞を収集する必要があることが明らかになった.現在,この条件を満たす細胞群を心室内および外層から分離する方法を開発中である.
3一方,細胞内Ca変化を画像として記録し,細胞内の不均一性を検討する実験をおこなった。その結果,遅延後電位の発生時には,細胞内Ca濃度の上昇は不均一で局所的なCa濃度増加が細胞内を伝搬するCa波の発生が観察され,細胞内Cの増加と伝搬が遅延後電位の原因となることが明らかになった.これに対し,活動電位を,低カリウム,セシウム,キニジン,刺激頻度減少などの組合せにより著明に延長させた際の細胞内Ca動態は,細胞内にほぼ均一な持続的な上昇を示した.この条件で発生する早期後電位の際も同様であった。したがって,これらの方法によるCaT持続時間の延長は活動電位延長の結果であった.
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