| 研究概要 |
1.ヌードマウスへの移植
神経内分泌腫瘍としての甲状腺髄様癌を用いた。昨年度3例の髄様癌症例の手術を行い,それらの腫瘍組織を移植したが,最後の症例が継代されているのみで,前者は壊死に陥いった。3例目も3代目の継代であり、その血液を用いて,カルシトニン,PDN-21(カタカルシン),CGRP値を測定したところ,それぞれ68pg/ml,11pg/ml,37mg/mlと低く十分にカルシトニン関連蛋白を産生,放出しているのかどうか疑しいと考えられた。
2.家兎PDN-21、IgGの精製
家兎抗ヒトIgGをパパイン処理し,Fab・Fc分画にA-Slpharose CL-4Bカラムを用いて分離した。家兎IgG(6-15mg/ml)リン酸Na緩衝液でインキュベートした。
3.抗PDN-21抗血清からえた抽出家兎免疫グロブリンの純質を免疫電気気泳動を用いて検討した結果,IgGに対する沈降線が明瞭に認められた。さらに,パパイン加水分解後,Fab・Fe分画はカラムに鋭いピークで抽出された。
4.精製IgG・Fab分画のヨード化
精製家兎IgGとFab分画をラクトペルオキシダーゼ法により, ^<125>Iと結合させた。抗PDN IgGのヨード化はリン酸Na緩衝液で行い,ヨードを用いた。ヨード化の ^<125>I-PDN-21結合IgG,Fabの生物学活性は十分に保存されていると推測された。
5.血清PDN-21,CGRD,カルシトニン値の測定
血清値は研究代表者らにより確立されたRIA法で行った。
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