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日本型ライム病ボレリア症の診断法とワクチン開発に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号 03807025
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 細菌学
研究機関静岡県立大学

研究代表者

岩本 義久  静岡県立大学, 薬学部, 助教授 (60046290)

研究分担者 福長 将仁  福山大学, 薬学部, 教授 (20132483)
増澤 俊幸 (増沢 俊幸)  静岡県立大学, 薬学部, 助手 (10181645)
柳原 保武  静岡県立大学, 薬学部, 教授 (30046255)
研究期間 (年度) 1991 – 1993
研究課題ステータス 完了 (1993年度)
配分額 *注記
1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
1993年度: 400千円 (直接経費: 400千円)
1992年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
1991年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
キーワードBorrelia burgdorferi / ライム・ボレリア症 / PCR / RFLP / ワクチン / Osp A / Osp B / 鞭毛 / 単クローン抗体 / 抗原構造 / シュルツェマダニ / ヤマトマダニ / 単クロ-ン抗体 / Ixodes persulcatus / Ixodes ovatus
研究概要

遺伝子診断法の開発 ライム病ボレリアの鞭毛蛋白遺伝子、及び主要表層蛋白A(Osp A)並びにOsp B遺伝子増幅プライマー対を合成し、これらの増幅性を調べた。鞭毛プライマーにより日米欧のすべてのライム病ボレリア、並びに回帰熱ボレリアの遺伝子を増幅検出することができた。本プライマー対を用いて増幅したPCR産物を再度PCRする二段階PCR法により1個のボレリアを検出することを可能とした。本プライマー対を用いて実験的感染マウス尿、並びに耳介組織からのボレリア遺伝子の検出診断が可能であることを明らかにした。更に、Osp A-Osp Bプライマーを用いて増幅されたDNAを制限酵素断片長多型性解析することにより、ライム病ボレリア4遺伝種、B.burgdorferi、B.garinii、B.afzelii、並びにB.japonicaの同定が可能であることを明らかにした。
予防ワクチンの開発 ddYマウス足蹠皮下に病原性ボレリアを接種すると、5日から14日かけて足の腫張が見られた。この反応は死菌体、あるいは培地の投与では誘発されず、特異的病変であることが明らかとなった。また、感染動物の膀胱、心臓から効率よくボレリアが分離され、本感染実験系が有用であることを明らかにした。本モデルを用いて主要感染防御抗原とされるOsp A、Osp Bの性状を異にする株間での交差感染防御活性を調べた。Osp A、Osp Bの免疫学的性状を異にする株間では交差感染防御が成立せず、また同じ免疫学的性状のOsp A、Osp Bを保有する株間でも、交差感染防御は不完全であり、このほかの感染防御抗原の関与が示唆された。この他の感染防御抗原としてOsp Cの関与が予想され、現在本抗原の感染防御活性を検討中である。以上の結果はその地域ごとに発生が予想される感染防御抗原型の菌株をワクチンとして用いなければならないことを強く示唆し、流行する菌株の迅速な同定法の開発が今後重要な課題となるであろうことを明らかにした。

報告書

(4件)
  • 1993 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1992 実績報告書
  • 1991 実績報告書
  • 研究成果

    (27件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (27件)

  • [文献書誌] Toshiyuki Masuzawa: "Experimental Borrelia burgdorferi Infection of Outbred Mice." J.Clin.Microbiol.30. 3016-3018 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Masahito Fukunaga: "The 23S/5S Ribosomal RNA Genes(rrl/rrf)Are Separated from the 16S Ribosomal RNA Gene(rrs)in Borrelia burgdorferi,the Aetiological Agent of Lyme Disease." J.Gen.Microbiol.138. 871-877 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Toshiyuki Masuzawa: "Protective Activity of Antisera against Isolates of Borrelia burgdorferi from Various Geographical Origins." Microbiol.Immunol.37. 79-83 (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Masahito Fukunaga: "Analysis of Borrelia Species Associated with Lyme Disease by rRNA Gene Restriction Fragment Length Polymorphism." J.Gen.Microbiol.139. 1141-1146 (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 増澤俊幸: "ライム病ワクチン開発の動向." 日本細菌学雑誌. 48. 385-393 (1993)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Toshiyuki Masuzawa: "Experimental Induction of Lyme Arthritis in Outbred Mice." Microbiol.Immunol.(印刷中).

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Toshiyuki Masuzawa et al.: "Experimental Borrelia bougdorferi infection of outbred mice." J Clin. Microbiol.30. 3016-3018 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Masahito Fukunaga et al.: "The 23S/5S ribosomal RNA genes (rrl/rrf) are separated from the 16S ribosomal RNA gene (rrs) in Borrelia burgdorferi, the aetiological agent of Lyme disease." J.Gen. Microbiol.138. 871-877 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Toshiyuki Masuzawa et al.: "Protective activity of antisera against isolates of Borrelia burgdorferi from various geographical origins." Microbiol. Immunol.37. 79-83 (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Masahito Fukunaga et al.: "Analysis of Borrelia species associated with Lyme disease by rRNA gene restriction fragment length polymorphism." J.Gen.Microbiol.139. 1141-1146 (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Toshiyuki Masuzawa.: "Current status of vaccine development of Lyme borreliosis." Jpn.J.Bacteriol.48. 385-593 (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Toshiyuki Masuzawa et al.: "Experimental induction of Lyme arthritis in outbred mice." Microbiol.Immunol.(in press).

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Toshiyuki Masuzawa: "Experimental Borrelia burgdorferi Infection of Outbred Moce." J.Clin.Microbiol.30. 3016-3018 (1992)

    • 関連する報告書
      1993 実績報告書
  • [文献書誌] Masahito Fukunaga: "The 23S/5S Ribosomal RNA Genes (rrl/rrf) Are Separated from the 16S Ribosomal RNA Gene (rrs) in Borrelia burgdorferi,the Aetiological Agent of Lyme Disease." J.Gen.Microbiol.138. 871-877 (1992)

    • 関連する報告書
      1993 実績報告書
  • [文献書誌] Toshiyuki Masuzawa: "Protective Activity of Antisera against Isolates fo Borrelia burgdorferi from Various Geographical Origins." Microbiol.Immunol.37. 79-83 (1993)

    • 関連する報告書
      1993 実績報告書
  • [文献書誌] Masahito Fukunaga: "Analysis of Borrelia Species Associated with Lyme Disease by rRNA Gene Restriction Fragment Length Polymorphism." J.Gen.Microbiol.139. 1141-1146 (1993)

    • 関連する報告書
      1993 実績報告書
  • [文献書誌] 増澤俊幸: "ライム病ワクチン開発の動向," 日本細菌学雑誌. 48. 385-393 (1993)

    • 関連する報告書
      1993 実績報告書
  • [文献書誌] Toshiyuki Masuzawa: "Experimental Induction of Lyme Arthritis in Outbred Mice." Microbiol.Immunol.38 (印刷中). (1994)

    • 関連する報告書
      1993 実績報告書
  • [文献書誌] Masuzawa,T.: "Experimental Borrelia burgdorferi infection of outbrd mice." J.Clin.Microbiol.30. 3016-3018 (1992)

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書
  • [文献書誌] Fukunaga,M.: "The 23S/5S ribosomal RNA genes (rrl/rrf) are separate from the 16S ribosomal RNA gene (rrs) in Borrelia burgdorferi,the aeti ologic agent of Lyme disease." J.Gen.Microbiol.138. 871-877 (1992)

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書
  • [文献書誌] Masuzawa,T.: "Protective activity of antisera against isolates of Borrelia burgdorferi from various geographical origins" Microbiol.Immunol.

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書
  • [文献書誌] Fukunaga,M.: "Analysis of Borrelia species associated with Lyme disease by rRNA gene restriction fragment length polymorphism" J.Gen.Microbiol.

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書
  • [文献書誌] 増沢 俊幸: "ライム病ワクチン開発の動向" 日本細菌学雑誌.

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書
  • [文献書誌] Masuzawa,T.: "Antigenic properties of Borrelia burgdorferi isolated from Ixodes ovatus and Ixodes persurcatus in Hokkaido,Japan" J.Clin.Microbiol.29. 1568-1573 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] Isogai,E.: "Serological survey for Lyme disease in Sikadeer(Cervus nippon yesoensis)by enzymelinked Immunosorbent assay(ELISA)" Microbiol.Immunol.35. 695-703 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] Masuzawa,T.: "Immunological properties of Borrelia burgdorferi isolated from the Ixodes ovatus in Shizuoka,Japan" J.Clin.Microbiol.35. 913-919 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書
  • [文献書誌] Kobayashi,Y.: "Leptospirosis" University of Tokyo Press, 534 (1991)

    • 関連する報告書
      1991 実績報告書

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公開日: 1991-04-01   更新日: 2016-04-21  

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