| 研究課題/領域番号 |
04404088
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| 研究種目 |
一般研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
結晶学
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| 研究機関 | 長岡技術科学大学 |
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研究代表者 |
三井 幸雄 長岡技術科学大学, 工学部, 教授 (40012637)
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| 研究分担者 |
河野 源 東レ(株), 医療システム研究所, 主席研究員
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| 研究期間 (年度) |
1992 – 1994
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| 研究課題ステータス |
完了 (1994年度)
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| 配分額 *注記 |
22,000千円 (直接経費: 22,000千円)
1994年度: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円)
1993年度: 5,000千円 (直接経費: 5,000千円)
1992年度: 14,000千円 (直接経費: 14,000千円)
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| キーワード | 2次元X線回折計 / 蛋白結晶学 / サイトカイン / インターフェロン / X線結晶解析 / 蛋白質工学 / 構造一活性相関 / 構造-活性相関 / X線回折計 / 結晶化 / コンピューターグラフィックス |
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| 研究概要 |
1)X線回折計の整備
本研究費による「回折X線」記録部の購入により、既有の部分と結合する事により、イメージングプレートX線回折計が完成し、極めて良好なデータが定常的に収集できる様になった。現在、結晶冷却装置との組み合わせの作業が進行中である。
2)コンピュータ・グラフィックス装置の整備
本研究費による「CPU上級化システム」の購入により、既有の装置の性能が一段と向上した。
3)マウスのβ型インターフェロンの構造精密化
上記の1)、2)のシステム等を活用して、2.15A分解能の回折データを収集し、結晶学的信頼因子Rが19.1%のレベルまで、構造を精密化することに成功した。その結果Aヘリックス部分のモデルが大幅に修正された(EMBO Journal11.3193-3201(1992);更にJ.Mol.Biol.に投稿済み)。
4)精密な構造に基づくTypeIインターフェロンの構造予測
ヒトのαD型、ヒトのβ型、ウシ及びヒツジのτ型について立体構造予測を行った。これにより、Type Iインターフェロンに関する構造活性相関データを系統的に整理することが出来た。Pharmacology & Therapeutics誌に掲載されたその成果(58.93-132(1993))は、サイトカイン蛋白質全体の中で、他に例を見ない徹底的なものである。τ型に関する構造予測は、Missouri大学のR.M.Roberts教授らとの協力によって行われ、その成果は、J.Interferon & Cytokine Research誌に投稿準備中である。
5)ヒトのβ型インターフェロンの結晶化への再挑戦
1983年〜1985年に行われた試みは、完全に失敗であったが、今回(1994年)の再挑戦(新しく調製した試料による)の結果も同じであり、この系には、結晶化を阻む本質的な原因が有ることを確認した。今後、新たな研究費の補助により動的光散乱装置を購入して、結晶化母液中での標的蛋白質の会合状態をモニターしながら、試料の状態を変える、等のよりシステマティックな努力が必要である。
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