| 研究課題/領域番号 |
04454204
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| 研究種目 |
一般研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
ウイルス学
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| 研究機関 | (財)東京都神経科学総合研究所 |
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研究代表者 |
保井 孝太郎 (財)東京都神経科学, 微生物学・免疫学・総合研究所・研究部門, 参事研究員 (90073080)
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| 研究分担者 |
菅又 昌実 (財)東京都神経科学総合研, 微生物学・免疫学, 流動研究員 (00091041)
宮本 道子 (財)東京都神経科学総合研, 微生物学・免疫学, 主任 (40190821)
木村 純子 (財)東京都神経科学総合研, 微生物学・免疫学, 主任 (20142151)
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| 研究期間 (年度) |
1992 – 1994
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| 研究課題ステータス |
完了 (1994年度)
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| 配分額 *注記 |
6,600千円 (直接経費: 6,600千円)
1994年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
1993年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
1992年度: 4,600千円 (直接経費: 4,600千円)
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| キーワード | 日本脳炎ウイルス / 神経病原性 / 神経細胞 / 受容体 / E蛋白 / prM蛋白 / エンベロープ / E-Mヘテロ2量体 / E蛋白のホモ3量体 / レセプター分子 / 感受性 / 細胞受容体 / M蛋白 / preM蛋白 / E蛋白構造 |
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| 研究概要 |
日本脳炎ウイルスの示す神経組織特異的病原性が、どのような因子によって現れるかについて解析した。ラット脳細胞初代培養および培養株細胞を用いて、以下のことが明らかになった。1、日本脳炎ウイルスは、神経細胞においてのみ感染増殖し、グリア細胞には感染しない。2、日本脳炎ウイルスは、幼若型神経細胞には吸着・感染するが、分化成熟が進行しシナプス形成するようになった神経細胞には吸着・感染しない。3、日本脳炎ウイルスに感受性の細胞は、非感受性細胞に比べウイルスの吸着及び細胞内への取り込み効率が高い。4、細胞内にウイルスから抽出したゲノムRNAを直接注入すると、非感受性細胞内でもウイルスが増殖できる。5、感受性細胞膜画分から、非感受性細胞には存在しないウイルス粒子E蛋白と結合する受容体候補蛋白を検出分離し、cDNAの一部をクローニングする事ができた。一方日本脳炎ウイルス粒子形成機構を解析して、以下のことが明らかになった。1、ウイルス粒子エンベロープを形成するprM蛋白とE蛋白は、細胞内でヘテロ2量体を形成する形で合成され、細胞外に放出される過程でprM蛋白がM蛋白へとプロセスされる。2、プロセスされたM-Eヘテロ2量体は酸性条件下でEホモ3量体へと変化する。3、E蛋白のこの構造変化は、細胞受容体との結合後に起こる細胞膜とエンベロープとの融合反応を誘導する。4、prM-Eヘテロ2量体の形成には、prM蛋白C末端が関与しており、E蛋白の構造構築と細胞内輸送に必要である。5、E蛋白の中和抗体エピトープを構成するアミノ酸に置換を導入すると、神経病原性が低下する。以上の結果から、日本脳炎ウイルスの示す神経病原性は、感受性細胞膜に存在する細胞受容体とE蛋白との結合効率とE蛋白の構造変化によって規定されており、E蛋白構造構築と細胞内輸送には、prM蛋白が重要な役割をしていることが明らかになった。
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