| 研究課題/領域番号 |
04454402
|
|---|
| 研究種目 |
一般研究(B)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 研究分野 |
泌尿器科学
|
|---|
| 研究機関 | 京都大学 |
|---|
研究代表者 |
藤田 潤 京都大学, 医学部, 教授 (50173430)
|
|---|
| 研究分担者 |
中山 広樹 京都大学, 医学部, 助教授 (70212107)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
1992 – 1993
|
| 研究課題ステータス |
完了 (1993年度)
|
| 配分額 *注記 |
4,700千円 (直接経費: 4,700千円)
1993年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
1992年度: 3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
|
|---|
| キーワード | 精巣 / PCR / 遺伝子発現 / 不妊症 / キナーゼ / 細胞培養 / フォスファターゼ / mRNA |
|---|
| 研究概要 |
男性不妊症の多くは精巣の造精機能の低下を原因としている。しかし、生殖細胞の増殖分化の分子的な制御機構はほとんど明らかにされておらず、男性不妊症の原因となる遺伝子変化も不明である。そのため原因に応じた適切な治療は不可能な状況である。本研究の目的は、新しい分子生物学的な技術を応用して、生殖細胞の分化制御に関与する遺伝子群を同定し、男性不妊症における遺伝子の変化を明らかにすることであった。また遺伝子機能の解析に必要な生殖細胞の培養系を確立することであった。その結果、
1.(1)マウス精巣、精母細胞、精子細胞それぞれのcDNAライブラリーを作成した。(2)生殖細胞の各分化段階で発現している蛋白チロシンフォスファターゼ群を、既知のもので保存されているアミノ酸配列とPCR法とを利用して同定した。さらに同様の方法により、生殖細胞で発現している蛋白チロシンキナーゼ群を同定した。(3)cDNAライブラリー同士のサブトラクションにより、生殖細胞の分化に特異的な遺伝子を同定し現在解析中である。
2.臨床の精巣バイオプシー標本を利用して遺伝子発現を解析するために、ラジオアイソトープを用いないで極微量の材料から遺伝子発現量を定量できる新しいRT-PCR法を開発した。
3.マウス生殖細胞を培養するために、セルトリ細胞株を樹立した。また、ヒトdysgerminoma細胞株を樹立し、その遺伝子変化を解析中である。
4.肥満細胞とは異なり、生殖細胞ではc-kitチロシンキナーゼを介したシグナル伝達にmi遺伝子座産物が必須では無いこと、mi変異マウスでは、子宮内反症とともに胎児数の減少がみられることを明らかにした。
|
