| 研究課題/領域番号 |
04454572
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| 研究種目 |
一般研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
血液内科学
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
仁保 喜之 九州大学, 医学部, 教授 (60091287)
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| 研究分担者 |
岩崎 浩巳 九州大学, 医学部, 医員
久保田 晃 九州大学, 医学部, 医員
池松 渉 九州大学, 医学部, 医員
下田 和哉 九州大学, 医学部, 医員
岡村 精一 九州大学, 医学部, 講師 (20136435)
大野 裕樹 九州大学, 医学部, 医員
原田 直樹 九州大学, 医学部, 医員
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| 研究期間 (年度) |
1992 – 1994
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| 研究課題ステータス |
完了 (1994年度)
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| 配分額 *注記 |
6,000千円 (直接経費: 6,000千円)
1994年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
1993年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
1992年度: 2,900千円 (直接経費: 2,900千円)
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| キーワード | G-CSF レセプター / 血小板 / フローサイトメトリー / c-kit / HEL / Jak1 / Jak2 / Syk / G-CSFレセプター / CD34陽性細胞 / 白血病 / GM-CSF / G-CSF / レセプター / モノクローナル抗体 / 刺激伝達 / JAK2 / 燐酸化 / RT-PCR / ノーザン法 |
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| 研究概要 |
ヒトの造血に影響を与えるサイトカインのレセプターに以下の3点を明かにすることを目的とした.レセプターの正確な分布状態の同定.2.サイトカインよるレセプターのmRNAおよび蛋白発現レベルの調節状況とリガンド反応性.3.CSFレセプター後の増殖能や分化能と関連する刺激伝達物質の同定.これらの初期の目的は研究期間中に達成できたと考えられる.
G-CSFやエリスロポエチン(Epo)を蛍光標識したリガンド結合能として検索するフローサイトメトリーによるレセプターの解析法を開発した.一部のものではラジオレセプターアッセイ法による解析と比較し、その正確さを確認した.また,GM-CSFレセプターα鎖(GM-CSFR)に対するモノクローナル抗体を作成した.さらに,GM-CSFRおよびG-CSFレセプター(G-CSFR)に対するポリクローナル抗体も作成した.これらを用いて,フローサイトメトリーでG-CSFR,GM-CSFR,Epo-Rそしてstem cell factorのレセプターであるc-kitの発現を検索した.
正常および白血病や骨髄異形成症候群などで各々のレセプターの発現状態を明らかにした.さらに,血小板にG-CSFRが存在して機能を有していることを証明した.このことは血小板やその前駆細胞である骨髄巨核球にG-CSFRmRNAが存在することもRT-PCR法で確認した.可溶性G-CSFRが血清中に存在していることを,我々が作成した抗体を利用した方法,リガンド結合能を利用した方法およびRT-PCRで証明した.
G-CSFにより増殖する白血病細胞株と分化する白血病細胞株を用いて,G-CSF刺激後の増殖刺激の伝達にはJAK1およびJAK2キナーゼが関与し、分化シグナルの伝達にはSYKキナーゼが関与していることを証明した.
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