研究課題/領域番号 |
04558023
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研究種目 |
試験研究(B)
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配分区分 | 補助金 |
研究分野 |
物質生物化学
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研究機関 | 九州大学 |
研究代表者 |
伊藤 明夫 九州大学, 理学部, 教授 (30037379)
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研究分担者 |
福本 尚徳 福岡県工業技術センター, 主任研究員
赤尾 哲之 福岡県工業技術センター, 主任研究員
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研究期間 (年度) |
1992 – 1993
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研究課題ステータス |
完了 (1993年度)
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配分額 *注記 |
4,100千円 (直接経費: 4,100千円)
1993年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
1992年度: 2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
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キーワード | 合成二分子膜 / リポソーム / 遺伝子導入 / DNA・二分子膜相互作用 / リポソ-ム |
研究概要 |
2分子膜化合物と導入されるべき物質との複合体の性質、2分子膜(リポソーム)と細胞との相互作用、細胞膜と融合したのちの導入物質と2分子膜化合物の運命、等についての基礎的な研究を行い、各細胞、各物質(核酸かタンパク質か)に最適の化合物を設計することを目的とした。得られた成果の概要は次の通りである。 1.2分子膜の物性と遺伝子導入能の関係:4級アミンの親水性部を持ち、グルタミン酸、アスパラギン酸、ジエタノールアミンをコネクターとし、テ-ルおよびスペーサー部の異なる化合物を系統的に合成した。これらの化合物の形態、相転移温度、リポソームとしての安定性等の物理化学的性質と、培養細胞へのDNAの導入効率との関係を検討した結果、培養温度より低い相転移温度を持ち、小さな安定したリポソームを形成できる化合物が高い遺伝子導入能を示した。つぎに、数種の細胞について同様の検討を行ったところ、基本的要求は変わらないが、効率の度合いは細胞によってかなり異なっており、細胞によって2分子膜化合物に対する選択性があった。 2.高い遺伝子導入能をもつ化合物の分子設計:上記の結果に基づいて、培養温度より低い相転移温度をもち、2分子膜リポソームを形成すると考えられる化合物を新たに8種設計・合成して、それらの遺伝子導入能を調べた。以前得ていた化合物より高い活性を示す化合物を得ることが出来た。 3.2分子膜・DNA複合体の物性:複合体のDNase処理、CDスペクトル、NMRスペクトル、蛍光特性、形態観察等を行った。複合体を形成することによって、両者とも構造変化が観察された。二分子膜はその分子配向性が乱され、その程度は遺伝子導入能の高い相転移温度が培養温度より少し低いものが最も大きかった。一方、エチジウムブロミドによる蛍光特性の変化から、DNAヘリックスにおける塩基間の間隔も広がっていることが示唆された。
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