• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 前のページに戻る

タンパク質の迅速合成法の一般化とそれを用いたシステイン含有タンパク質の合成

研究課題

研究課題/領域番号 04640527
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 天然物有機化学
研究機関大阪大学

研究代表者

相本 三郎  大阪大学, たんぱく質研究所, 教授 (80029967)

研究分担者 北條 裕信  大阪大学, たんぱく質研究所, 助手 (00209214)
研究期間 (年度) 1992 – 1993
研究課題ステータス 完了 (1993年度)
配分額 *注記
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1993年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
1992年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
キーワードペプチド合成 / 蛋白質合成 / チオエステル法 / セグメント縮合 / 固相法 / TAT蛋白質 / ペプチド合成法 / 蛋白質合成法 / タンパク質合成 / チオエステル / 固相合成法
研究概要

筆者らが開発した蛋白質の化学合成法であるチオエステル法を、システイン含有蛋白質の合成にも適用できるようにすべく、検討を行った。
昨年開発したシステイン含有部分保護ペプチドチオエステルの調製法をもとに、さらに検討を行った結果、Npys化アミノ酸を用いる固相合成法により、多数のシステイン残基をもつ部分保護ペプチドチオエステルであっても確実に目的物を得ることができることが判明した。すなわち、トリフルオロ酢酸(TFA)処理でペプチドを遊離させることができる樹脂上に、チオエステルを介してペプチドを伸長させる。その際、側鎖にTFAで除去できる保護基をもつNpysアミノ酸誘導体を用いる。システインにおいては、Npys-Cys(Tmb)(Tmb:2、4、6-トリメチルベンジル基)を用いて合成する。保護ペプチド樹脂をTFAで処理し、S-Tmbペプチドチオエステルを手際よく得ることができた。
多数のシステイン残基を分子内に含むヒト免疫不全ウイルス(HIV)の産生する遺伝子活性化蛋白質であるTAT蛋白質を合成対象として取り上げ、これに対応する部分保護ペプチドチオエステルを、Bocアミノ酸あるいはNpysアミノ酸を用いて合成した。調製したセグメントを銀イオン存在下、順次縮合し、TAT蛋白質の全アミノ酸配列に対応する保護蛋白質を得た。全ての保護基を除去した後、高純度のTAT蛋白質を得ることができた。これを用いて亜鉛存在下、非存在下における構造の変化を、CDスペクトルとゲルクロマトグラフィーにより検討したが、現時点では、顕著な構造変化や2量体化などは観測されていない。この点については、今後さらに検討を加えていく予定である。
本研究により、チオエステル法をシステイン含有蛋白質の合成にも適用することが可能となった。

報告書

(3件)
  • 1993 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1992 実績報告書
  • 研究成果

    (12件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (12件)

  • [文献書誌] Yeondae-Kwon: "Preparation of partially protected peptide thioesters containing cysteine residue and their segment condensation" Peptide Chemistry 1992. 58-60 (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hironobu Hojo: "Preparation of S-protected-cysteine-containing peptide thioesters and its application to synthesis of polypeptide" Peptide Chemistry 1993. 9-12 (1994)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yeondae Kwon: "Preparation of partially protected peptide thioesters containing cysteine residue and thier segment condensation" Chemistry Letters. 881-884 (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hironobu Hojo: "Development of a method for protein synthesis using S-alkyl thioester of partially protected peptide segments" Doctral thesis. 1-100 (1994)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yeondae Kwon, Tuoheng Zhang, Marcelo P.bemquerer, Mineko Tminaga, Hironobu Hojo and Saburo Aimoto: "Preparation of partially protected peptide thioesters containinog cysteine residue and thier segment condensation" Chemistry Letters. (5). (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yeondae Kwon, Tuoheng Zhang, Hironobu Hojo and Saburo Aimoto: "Preparation of partially protected peptide thioesters containinog cysteine residue and thier segment condensation" Peptide Chemistry 1992. 58-60 (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hironobu Hojo: "Development of a method for protein synthesis using Salkyl thioester of partially protected peptide segments" Doctral thesis. (1994)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] hironovu Hojo, Shoko Yoshimura and Saburo Aimoto: "Preparation of S-protected-cysteine-containing peptide thioesters and its application to synthesis of polypeptide" Peptide Chemistry 1993. 9-12 (1994)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1993 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yeondae Kwon: "Preparation of partially protected peptide thioesters containing cysteine residue and their segment condensation" Peptide Chemistry 1992. 58-60 (1993)

    • 関連する報告書
      1993 実績報告書
  • [文献書誌] Hironobu Hojo: "Preparation of S-protected-cysteine-containing peptide thioesters and its application to synthesis of polypeptide" Peptide Chemistry 1993. 9-12 (1994)

    • 関連する報告書
      1993 実績報告書
  • [文献書誌] Yeondae Kwon: "Preparation of partially protected peptide thioesters containing a cysteine residue and their segment condensation" Chemistry Letters. 881-884 (1993)

    • 関連する報告書
      1993 実績報告書
  • [文献書誌] Y.Kwon,R.Zhang,H.Hojo,and S.Aimoto: "Preparation of Partially Protected Peptide Thioesters Containing Cysteine Residues and Their Segment Condensation" Peptide Chemistry 1992,N.Yanaihara(Ed.)Protein Research Foundation. (1993)

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書

URL: 

公開日: 1992-04-01   更新日: 2016-04-21  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi