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CD14のエンドトキシンショックにおける意義解析

研究課題

研究課題/領域番号 04670293
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 免疫学
研究機関大分医科大学

研究代表者

瀬戸口 美保子  大分医科大学, 医学部, 助手 (20236110)

研究分担者 秋月 真一郎  大分医科大学, 医学部, 助手 (80159334)
山本 俊輔  大分医科大学, 医学部, 教授 (90040188)
研究期間 (年度) 1992
研究課題ステータス 完了 (1992年度)
配分額 *注記
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1992年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
キーワードCD14 / recombinant / expression / transgenic mouse / shock / cDNA
研究概要

1.膜非結合型rGD14の分離:nativeおよびcDNAの3'側コードにmutationを加えC末端部が種々の長さで短縮したクローンを作成し、大腸菌および昆虫系で発現させた。
2.膜非結合型rCD14のin vitro効果の検討:Mφ細胞株をLBPを含む血清(硝酸銀液を皮内注射したマウスより得られた急性期血清)存在下にLPSで刺激し、TNFの遊離を目下検討中である。
3.膜非結合型rGD14のin vivo効果の検討:LPS投与前後のマウスに種々の濃度の変異rCD14蛋白を注射しショックに対する効果を検討中である。
4.CD14遺伝子TGマウスの作成:未変異および変異マウスCD14ゲノム遺伝子の5'上流に肝細胞特異的蛋白α_2Uグロビンのプロモーター、3'末端にSV40のポリAシグナルを結合した変異CD14遺伝子を作成し、BDA/2Ncrj/C57BL/6NcrjF1マウスの授精卵に注入し、ICR偽妊娠マウスで発生させた。現在まで膜結合型およびPI結合部を改変し膜非結合型にしたCD14遺伝子トランスジェニック(TG)マウスを各々一匹づつ得ており、現在pairingによりこれらのTGマウスの増殖を行っている。これらはいずれもCD14の常時発現糸であるが、誘導発現系としてメタロチオネイン遺伝子のプロモーターを連結したTGマウスも作成中である。さらに純系TGマウスの作成もC57BL/6Jマウスを用いて試みている。
5.CD14遺伝子TGマウスにおけるCD14の発現および副次変化の検素:肝臓およびその他の組織における発現状態についてのノーザン法およびPAP法での解析はまだ使用可能なF2が得られていないため行っていない。一方、C57BL/6Jマウスではこれまで高い頻度で食仔されること、および生存中の一匹の発育が異常に悪いことなどを経験しており、これらがTGと関連した現象か否かを検討中である。
6.遺伝子標的法によるCD14遺伝子廃失マウスの作成:いくつかの相同組替えES細胞を分離しており、発生初期胚注入を検討中である。

報告書

(1件)
  • 1992 実績報告書
  • 研究成果

    (3件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (3件)

  • [文献書誌] Nobuyoshi Nasu: "Molecular and physiological properties of murine CD14" Int Immunol.3. 205-213 (1991)

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書
  • [文献書誌] 山本 俊輔: "顆粒球・単球系細胞の高度LPS刺激系-CD14とLPS結合蛋白の遺伝子および蛋白の構造と機能" 免疫91 代謝. 28. 131-140 (1991)

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書
  • [文献書誌] Keiko Matsuura: "Identification of a tissue-specific regulatory element within the murine CD14 gene" J.Biol.Chem.267. 21718-21794 (1992)

    • 関連する報告書
      1992 実績報告書

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公開日: 1992-04-01   更新日: 2016-04-21  

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