| 研究課題/領域番号 |
04671116
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
形態系基礎歯科学
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| 研究機関 | 福岡歯科大学 |
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研究代表者 |
長 環 福岡歯科大学, 歯学部, 講師 (90131870)
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| 研究分担者 |
渡辺 健治 福岡大学, 薬学部, 教授 (40078689)
浜高家 尚子 福岡歯科大学, 歯学部, 助手 (50198800)
萩原 義郷 福岡歯科大学, 歯学部, 教授 (00088931)
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| 研究期間 (年度) |
1992 – 1993
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| 研究課題ステータス |
完了 (1993年度)
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| 配分額 *注記 |
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
1993年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1992年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
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| キーワード | 日和見感染 / Candida albicans / 酵母形発育 / 菌糸形発育 / 形態変換コントロール物質 / ペプチド様物質 / 飢餓処理 / 二形性真菌 / 形態分化因子 / 生物活性ペプチド |
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| 研究概要 |
研究目的
日和見感染を起こすCandida alblcansの病原性の一つに、組織への付着や侵入、あるいは本菌の酵母形-菌糸形形態変換が重要な因子として考えられている。本研究は、酵母形菌から菌糸を発現させる形態変換コントロール物質を、菌体内から抽出、精製する事を目的としている。
研究結果
1.目的物質抽出菌の設定
当研究室で開発したN-アセチルグルコサミン培地を用い、germ tubeを形成した対数期の菌を用いた。対照として酵母形発育中の対数期菌、飢餓処理した対数期菌、静止期菌、飢餓処理した静止期菌を用いた。
2.目的物質同定法の開発
飢餓処理による増殖停止菌を、同定用の菌とした。N-アセチルグルコサミン培地に基づき同定用の培地として亜鉛培地(形態発現のための準備が菌体内で起きている菌は、この培地の中でそのまま形態を発現することができる。一方準備していない形態発現停止状態の菌は、この培地中で全く形態発現を行わない)を開発した。これに同定用の菌と抽出された目的物質を加え培養し、形態観察により目的物質の同定を行った。
3.目的物質の抽出、阻精製
寒川らの方法(1983)に基づき、ペプチド様物質の抽出を行った。実験当初germ tube形成菌から特異的ペプチドが抽出されると考えていたが、菌糸発現誘導物質は、実験に用いた5種類の状態の菌全てから抽出された。イオン交換後のゲルろ過では菌糸発現誘導物質は、単一ピーク中に含まれたが、この画分の逆相カラムによるHPLC分析では、7つの活性画分を得た。
今後の発展性
HPLCを用いさらに精製を行えば、今後アミノ酸配列、核酸配列、プローブ作製等が可能となり、本菌の形態発現遺伝子の解析の一助となり得る。
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