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高プロリン含有唾液ペプチドP-B前駆体cDNAのクローニング

研究課題

研究課題/領域番号 04671149
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 機能系基礎歯科学
研究機関日本歯科大学新潟短期大学

研究代表者

伊勢村 知子  日本歯科大学新潟短期大学, 教授 (10112963)

研究期間 (年度) 1992 – 1994
研究課題ステータス 完了 (1994年度)
配分額 *注記
1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
1994年度: 400千円 (直接経費: 400千円)
1993年度: 400千円 (直接経費: 400千円)
1992年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
キーワード唾液 / 高プロリン / ヒト顎下腺 / cDNA / P-B / D29833 / 高プロリン含有ペプチド / クローニング / PCR / 顎下腺 / 高プロリン含有唾液ペプチド / 顎下腺cDNA
研究概要

ヒト唾液より単離された57残基より成る高プロリン含有唾液ペプチドP-Bの前駆体の有無を明らかにするためにP-BcDNAのクローニングを試みた。まずP-Bのアミノ酸配列に対応する混合オリゴヌクレオチドをプローブとしてヒト顎下腺cDNAライブラリーをスクリーニングしたがポジティブなクローンを得ることが出来なかった。そこで、ヒト顎下腺cDNAをテンプレート、コード鎖側プライマーとしてP-Bアミノ酸配列に対応する混合オリゴヌクレオチド、非コード鎖側プライマーとしてオリゴdTを用いるPCRを行なったところ、P-BcDNAが増巾された。このPCRに於てコード鎖側用に用意したプライマーは機能せず、両鎖ともオリゴdTをプライマーとして伸長した。P-BcDNAは0.8kbpであり、5'非飜訳領域、22残基のアミノ酸配列をコードするシグナル領域、P-B相当アミノ酸配列をコードする領域、終止コドンTAA、B'非飜訳領域、ポリA付加シグナル およびポリTを含む。従って唾液に含まれるP-Bは前駆体が分解されて生じるペプチドではなくて成熟タンパク質であることがわかる。ヒトゲノムDNAの各種制限酵素消化物のサザンハイブリダイゼーションの結果、複数のP-B関連遺伝子が存在する可能性が示唆された。また各種動物ゲノムEcoRI消化物のサザンハイブリダイゼーションの結果、各動物とも複数のバンドを示し、P-B関連遺伝子が広汎な動物に存在することがわかった。ヒト各種組織のノーザンハイブリダイゼーションの結果胎盤に5〜8kbのP-B関連m-RNAが存在することが示された。なおこのcDNAの塩基配列は遺伝研に登録されている。アクセッション番号はD29833である。

報告書

(4件)
  • 1994 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1993 実績報告書
  • 1992 実績報告書
  • 研究成果

    (7件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (7件)

  • [文献書誌] Satoko Isemura: "Molecular Cloningand Sequence Analysis of cDNA Coding for the Precursor of the Human Salivary Proline-Rich Peptide P-B" The Journal of Biochemistry. 115. 1101-1106 (1994)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1994 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 伊勢村 知子: "唾液高プロリン含有ペプチドP-BcDNAの塩基配列の解析" 生化学. 66. 788 (1994)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1994 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 伊勢村知子: "唾液高プロリン含有ペプチドP-BcDNAの塩基配列の解析と関連遺伝子の探索" 歯科基礎医学雑誌. 36(補). 160 (1994)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1994 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Satoko Isemura and Eiichi Saitoh: "Molecular cloning and sequence analysis of cDNA coding for the precursor of the human salivary proline-rich peptide P-B" The Journal of Biochemistry. 115. 1101-1106 (1994)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1994 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Satoko Isemura: "Molecular cloning and sequence analysis of cDNA coding for the precursor of the human salivary proline-rich peptide P-B" The Journal of Biochemistry. 115. 1101-1106 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] 伊勢村 知子: "唾液高プロリン含有ペプチドP-B cDNAの塩基配列の解析" 生化学. 66. 788- (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] 伊勢村 知子: "唾液高プロリン含有ペプチドP-B cDNAの塩基配列の解析と関連遺伝子の探索" 歯科基礎医学雑誌. 36(補). 160- (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書

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公開日: 1992-04-01   更新日: 2016-04-21  

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