| 研究課題/領域番号 |
04808032
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
放射線生物学
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
江島 洋介 京都大学, 放射線生物研究センター, 助教授 (50127057)
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| 研究分担者 |
佐々木 正夫 京都大学, 放射線生物研究センター, 教授 (20013857)
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| 研究期間 (年度) |
1992 – 1994
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| 研究課題ステータス |
完了 (1994年度)
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| 配分額 *注記 |
2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
1994年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1993年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1992年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
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| キーワード | AT / ヒト遺伝病 / 放射線感受性 / 放射線ハイブリッド / IRS-PCR / ヒト11番染色体 / 放射線ハイブリド / コスミド / 染色体移入 |
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| 研究概要 |
放射線高感受性を特徴とするヒト遺伝病のAT(アタキシタ・テランジェクタシア)を用い、ヒト放射線感受性遺伝子を単離することを目的として研究をおこない以下の成果を得た。
1.AT遺伝子の座位するヒト染色体11q23領域に欠失をもつと同時に放射線抵抗性を消失した細胞2859/4-1を用い、このヒト11q23欠失染色体をもつマウス細胞株を微小核融合法で作成した。ヒトAlu配列をプライマーにしたIRS-PCR法で欠失領域を解析し、AT遺伝子に近接する2種のDNAマーカーを単離した。
11q23領域に切断点をもつX/11転座染色体を用いて、ヒト11q23微小断片をもつ放射線ハイブリドを作成した。クローンRH12/1はAT細胞の放射線高感受性を相補するが他の2クローン(MH12/1,MH12/3)は相補せず、両者の差異領域に遺伝子が存在するという作業仮説を設定して解析をすすめた。
11q23領域内のDNAマーカーを用いて3クローンのヒト断片を解析した。RH12/1に固有のマーカーはなく、AT遺伝子にもっとも近接するとされるD11S384をも欠いていた。遺伝子がD11S384よりテロメア側DRD2〜D11S351領域内にあるという新しい可能性を示唆する。
RH12/1から作成したコスミドライブラリーから256個のヒト由来のクローンを分離し、21個の11番染色体由来クローンを同定したが、この中にはAT遺伝子を含むものはなかった。一方RH12/1からのIRS-PCR産物のなかから単離したプラスミドpBM8.9は11番染色体上のRH12/1に固有の領域内にあり、AT遺伝子にきわめて近接する可能性が高い。このマーカーをもとにAT遺伝子を探索してゆきたい。
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