| 研究課題/領域番号 |
04833005
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
分子細胞生物学
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
塩田 正樹 東京大学, 医学部(医), 助手 (80134526)
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| 研究期間 (年度) |
1992 – 1993
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| 研究課題ステータス |
完了 (1993年度)
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| 配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1993年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
1992年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
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| キーワード | 微小管結合蛋白質 / DNA複製 / DNAポリメラーゼアルファ / 核マトリックス / 酵素動力学 / リン酸化 / 細胞質 / 核 / MAP4 / 微小管重合促進部位 / ヒーラ細胞 / DNAポリメラーゼ アルファ / DNA複製装置 / 真性粘菌 / デオキシリボヌクレオチド三リン酸 / 動力学 |
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| 研究概要 |
微小管結合蛋白質(MAP)のDNA合成促進作用を単離した核マトリックス(DNAポリメラーゼアルファを含むDNA複製装置が結合している)及びDNAポリメラーゼアルファ(DNA複製酵素;DNA複製装置の一部をなす)を用いて解析した。その結果、1)MAPはDNAポリメラーゼアルファ活性を促進することによりDNA合成を促進すること、2)DNA合成の促進はMAPによるDNA複製装置のデオキシリボヌクレオチド三リン酸のKm値の低下作用に起因すること、3)このKm値の低下はDNA複製装置の休止型から活性型への変換に対応すること、等が明らかにされた。これらのことから、MAPはDNA複製装置に作用し、これを“始動"の状態に変化させる能力をもつことが明らかにされた。
また、MAPのリン酸化実験よりMAPのC末端にある微小管重合促進部位及び隣接したプロリンに富む領域のリン酸化がDNA合成に必須であることが明らかにされた。この結果は、この領域のリン酸化によりMAPが細胞質の微小管より遊離するという一般の見解と表裏の関係を示した。さらに、ヒーラ細胞等の増殖のさかんな細胞でMAPが核にも存在することが確かめられた。
以上より、MAPのリン酸化によりMAPが細胞質から核に移行し、DNA複製を調節するという制御機構の存在が示唆された。
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