研究課題/領域番号 |
04J09245
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研究種目 |
特別研究員奨励費
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配分区分 | 補助金 |
応募区分 | 国内 |
研究分野 |
動物生理・行動
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研究機関 | 北海道大学 |
研究代表者 |
二宮 陽介 北海道大学, 大学院地球環境科学研究科, 特別研究員(DC1)
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研究期間 (年度) |
2004 – 2006
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研究課題ステータス |
完了 (2006年度)
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配分額 *注記 |
2,800千円 (直接経費: 2,800千円)
2006年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2005年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2004年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
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キーワード | ドーパ脱炭酸酵素 / チロシン水酸化酵素 / 真皮細胞 / GBP / ドーパミン / メラニン / チロシン水酸化酵 / 尿酸 / Differential Display |
研究概要 |
メラニン合成経路の解明に向け、昆虫のドーパミンメラニン形成においてキーエンザイムとして働いている、TH(チロシン水酸化酵素)とDDC(ドーパ脱炭酸酵素)に注目し実験を進めてきた。脱皮期、THとDDCは、黒色縞模様直下の真皮細胞で、局所的にmRNAの発現が上昇し、TH・DDCタンパク質の局在を引き起こしていた。このようなTH・DDCの局所的な発現調節を解明する為に、真皮細胞におけるDDCの発現を誘導することが報告されている、GBP(growth blocking peptide)に注目して実験をおこなった。その結果、in vivo, in vitro両実験系において、TH・DDC共にGBPによる発現の誘導が確認された。また、このGBPによる発現誘導は、カルシウムキレート剤EGTAを反応溶液に加えることで完全に阻害されることから、細胞外カルシウムの細胞内への流入が不可欠であると考えられる。またカルシウム蛍光指示薬Fluo-3を使用し、カルシウム流入細胞を可視化したところ、黒色縞模様直下の真皮細胞でのみカルシウムの流入が観察された。このことから、GBPは細胞内カルシウム濃度を上昇させ、TH・DDC発現を誘導している。そしてこのGBPによる細胞内カルシウムの流入は、黒色縞模様直下の真皮細胞でのみ起こることが、ドーパミンメラニン形成を引き起こしていると考えられる。 また、ショウジョウバエ胚の創傷部位におけるTH・DDC発現誘導にERK(細胞外シグナル調節キナーゼ)活性化が関与していると報告されているが、GBPによるTH・DDC発現誘導において、ERK活性化はまったく関係していなかった。このことは、GBPによるTH・DDC発現誘導メカニズムは、これまで知られているものとは違う、新しいシグナル伝達経路であると考えられる。
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