糖鎖及び糖鎖複合体の解析・分子設計及び再構成

• 研究課題/領域番号: 05274102
• 研究種目: 重点領域研究
• 配分区分: 補助金
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 小川 智也 東京大学, 大学院農学生命科学研究科, 教授 (30087572)
• 研究分担者: 遠藤 正彦 弘前大学, 医学部, 教授 (20004616) ; 隅田 泰生 大阪大学, 理学部, 講師 (70179282) ; 畑中 保丸 富山医科薬科大学, 和漢薬研, 助教授 (30111181) ; 木曽 真 岐阜大学, 農学部, 教授 (90092931) ; 稲垣 冬彦 東京臨床医学総合研究所, 生理活性物質研究部門, 部長 (70011757) ; 長谷川 明 岐阜大学, 農学部, 教授 (10026429) ; 梶本 哲也 理化学研究所, 国際フロンティア・糖情報工学, 副チームリーダー (80185777) ; 楠本 正一 大阪大学, 理学部, 教授 (30028253)
• 研究期間 (年度): 1996
• 研究課題ステータス: 完了 (1996年度)
• 配分額: 135,400千円 (直接経費: 135,400千円); 1996年度: 37,300千円 (直接経費: 37,300千円); 1995年度: 36,000千円 (直接経費: 36,000千円); 1994年度: 33,100千円 (直接経費: 33,100千円); 1993年度: 29,000千円 (直接経費: 29,000千円)
• キーワード: aFGF / ヘパリン / セレクチン / LTA / ビオチン化プローブ / ヒアルロニダーゼ / LIF / GAG / シアロ複合糖質 / リポタイコ酸 / 光アフィニティープローブ / ピューロマイシン / コンドロイチン硫酸 / ユビキチン / リピドA / リガンド / グアニジドガラクトース / セラミド / プロテオグリカン

研究概要

稲垣はaFGFとヘパリンの相互作用、ミッドカインによるヘパリン認識および、ヒアルロン産結合ドメイン1inkの立体構造決定に関し、NMR法により成果を得た。隅田は、グラム陽性細菌のLTA画分からIL-6誘導活性を示す成分を分離し、それらが高分子量の糖脂質であることを解明した。長谷川と木曽は、種種のガングリオシドの合成に成功した。畑中は、新規プローブの開発とラベルタンパク質の単離操作の効率化に成功した。遠藤は、天然型および非天然型のグリコサミノグリカンの、酵素的合成ルートを開拓した。小川はコンドロイチン硫酸の再構成実験を通して、その生合成系の解析を共同研究により追求し、成果を得た。またLIFを対象として、動的細胞発現系を利用して糖鎖機能の解析を行った。北原は、糖タンパク質輸送阻害剤の機能ドメインに関して合成化学的研究を行い、成果を得た。豊島は非天然型の糖脂質を調製して、生理活性相関に知見をえた。長谷は、脳特異的糖鎖を調製し、人工糖脂質としてプローブ化した。岡崎はセラミドシグナル系の解析を進め、そのリン酸化誘導体の機能解析に知見を得た。以上の研究実績は、糖鎖複合体の解析・分子設計および再構成の総合的観点から、国際的に先端を行くものである。

研究成果

• [文献書誌] Takagaki,K.et al.: "Characterization and bioligocal significance of sialy alpha-2-3 galactosyl beta 1-4 xylosylbeta 1-(4-methvlumbelliferone)synthesized in cultured human skin fibroblasts." J.Biochem.119. 697-702 (1996)
• [文献書誌] Hatanaka,H.,et al.: "Tertiary structure of Destrin and structural similarity between two actin-regulating protein families" Cell. 85. 1047-1055 (1996)
• [文献書誌] Ehara,T.et al.: "STotal synthesis of VIM-2 ganglioside isolated from human chronic myelogenous leukemia cells." Carbohydr.Res.281. 237-252 (1996)
• [文献書誌] Ozaki,Y.,et al.: "Preparation of neoglycolipids with a definite suger chain moiety from glycoproteins." Anal.Biochem.241. 151-155 (1996)
• [文献書誌] Sawai,H.,et al.: "Ceramide-induced translocation of protein-kinase c-delta and c-epsilon to the cytosol-implication in apoptosis." J.Biol.Chem.272(in press). (1997)
• [文献書誌] Uozumi,N.et al.: "A fluorescent assay-method for GDP-L-Fuc-N-Acetyl-beta-D-glucosaminide alpha-1-6Fucosyltransferase activity,Involving high-performance liquid-chromatography." J Biochem.120. 385-392 (1996)
• [文献書誌] Kirsch,P.ら: "Synthesis of N-Acetylgluco saminyl Aspargine-Substitnted Puronycin Analogues" Bio. Med. chem.3. 1631-1636 (1995)
• [文献書誌] Ichikawa,S.ら: "Identification of the Receptor-recognition Surface of Boubyxin-II, an Insulinlike peptide of the Silkmoth Bombyx mori Critical Importance of B-chain Cerdral Part" J. Mol. Biol.253(5). 759-770 (1995)
• [文献書誌] Hotta,K.ら: "First total・synthesis of a cholinergic reuron-shecific ganglioside GQ1bα" J.Carbohydr. chem.14. 491-506 (1995)
• [文献書誌] Hatanaka,Y.ら: "A Carbene-Generating Biotihylated Lactosylceramide Analog as Novel Photoreactive Substrate for GM3 Synthase" Bio Med.Chem. Lett.5. 2859-2864 (1995)
• [文献書誌] Suda,S.ら: "Cytokine-Inducing Glyco lipids in the Lipoteichoic Acid Fracrion from Enterococcus hirae" FEMS Immun Med Microbiol.12. 97-112 (1995)
• [文献書誌] Saitoh,H.ら: "Enzymic reconstitution of glycosaminoglycan oligosaccharide chain using the transglycosylation reaction of bovine testicular hyaluronidase" J.Biol.Chem.270. 3741-3747
• [文献書誌] H.Hatanaka et al.: "Tertiary structuve of erabutoxin b in aqueous solution as elucidated by two-dimensional nuclear magnetic resonance" J.Mol.Biol.240. 115-166 (1994)
• [文献書誌] K.Nagata et al.: "Solution structurve of the epidermal growth factor like domain of heregulin-α.a ligand for p180^<2rbB-4>" The EMBO J.13. 3517-3523 (1994)
• [文献書誌] C.-T.Yuen K.et al.: "Sulfated Blood Group Lewis^a - A superior oligosaccharide ligand for human E-selectin" J.Biol.Chem.269. 1595-1598 (1994)
• [文献書誌] H-K,Ishida et al.: "Total synthesis of ganglioside GQlb" Carbohydr.Res.260. c1-c6 (1994)
• [文献書誌] Y.Hatanaka et al.: "A Novel Family of Aromatic Diazirines for Photoaffinity Labeling" J.Org.Chem.59. 383-387 (1994)
• [文献書誌] Y.Hatanaka et al.: "Synthesis of Nitro-Substituted Aryl Diazirines.An Entry to Chromogenic Carbene Precursors for Photoaffinity Labeling" Chem.Pharm.Bull.42. 826-831 (1994)
• [文献書誌] Fumitaka Goto et al.: "Recent aspects of glycoconjugate synthesis:A synthetic approach to the linkage region of proteoglycans" Pure & Appl.Chem.65. 793-801 (1993)
• [文献書誌] Yuji Matsuzaki et al.: "Stereocontrolled synthesis of GD_2" Carbohydr,Res.242. C1-C6 (1993)
• [文献書誌] Akira Hasegawa et al.: "Total synthesis of ganglioside GMl and GDla" J.Carbohydr.Chem.12. 354-361 (1993)
• [文献書誌] Yasuo Suda et al.: "The synthesis and in uitro and in vivo stability of 5-fluorouracil prodrugs which possess serum albumin binding potency" Biol.Pharm.Bull.16. 876-878 (1993)
• [文献書誌] Akira Takeda et al.: "Contribution of carbohydrate antigen sialyl lewis A and sialyl lewis X to adhesion of human cancer cells to vascular endothelium." Cancer Res.53. 354-361 (1993)
• [文献書誌] Yoshikazu Takaoka et al.: "Inhibition of N-acetylglucosaminyl transferase enzymes:chemical-enzymatic synthesis of new five-membered acitamido azasugars" J.Org.Chem.58. 4809-4812 (1993)