遺伝子工学的アプローチによるウイルス性肝病態進展の予測と治療法の開発

• 研究課題/領域番号: 05304031
• 研究種目: 総合研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 小俣 政男 東京大学, 医学部(病), 教授 (90125914)
• 研究分担者: 下遠野 邦忠 国立がんセンター, ウイルス部(研), 部長 (10000259) ; 小池 克郎 癌研究所, 遺伝子研究施設部(研), 部長 (30085625) ; 佐藤 千史 東京医科歯科大学, 医学部(病), 助教授 (60154069) ; 各務 伸一 名古屋大学, 医学部(病), 講師 (10115545) ; 林 紀夫 大阪大学, 医学部(病), 講師 (00144478)
• 研究期間 (年度): 1993
• 研究課題ステータス: 完了 (1993年度)
• キーワード: C型肝炎 / 超可変領域 / SSCP / 中和抗体 / B型肝炎 / 変異株 / X遺伝子 / HLA

研究概要

C型肝炎ウイルスでは、HCV-RNA量と治療効果の関連が強く指摘され、またHCV-RNA量とウイルスのgenotypeとは表裏の関係にあることが示されてた。さらに、治療抵抗性のC型肝炎ウイルスでは遺伝子変異をきたし易いHypervariable regionの変異率が高いことが示され、SSCPでウイルスの変異を検討したところ、インターフェロン治療にもかかわらず一部のC型肝炎ウイルスのバンドが消失せず、これはインターフェロン抵抗性のウイルスである可能性が示された。さらに、SSCPの検討によるウイルスの変異は、病期の進行にともない変異株が多くなることも示された。また、急性C型肝炎ウイルス感染の初期血清には、C型肝炎ウイルスのコア蛋白に対する抗体が産生されていることが明かとなった。このことは、中和抗体産生、ワクチン開発の突破口となる可能性があり、vitroの培養系の開発に期待がもたれた。しかしながら、この抗体に対しC型肝炎ウイルスが変異し持続感染を示す可能性が指摘された。
B型肝炎ウイルスでは、肝炎の重症化症例ではコアの変異株が高頻度に認められた。しかしながら、ダックの感染実験から、これら変異株の増殖能は野生株より低いことが明かとなった。また、B型肝炎ウイルスの各抗原蛋白発現の研究では、X遺伝子発現の調節機構にpromotor,enhancerの制御が明かとなった。
B型およびC型肝炎の慢性炎症の病態にHLA class Iに表出されている蛋白が標的になっている可能性が示された。

研究成果

• [文献書誌] Ehata T,Omata M et al: "Mutations in core nucleotide sequence of hepatitis B virus correlate with fulminant and severe hepatitis." J Clin Invest. 91. 1206-1213 (1993)
• [文献書誌] Chuang WL,Omata M et al.: "Concentrating missense mutations in core gene of hepatitis B virus:evidence for adaptive mutation in chronic hepatitis B virus infection." Dig Dis Sci. 38. 594-600 (1993)
• [文献書誌] Yokosuka O,Omata M et al.: "Expression of hepatitis C virus core protein as a fusion protein with maltose binding protein:detection of anti-hepatitis C core antibody by western blot." Dig Dis Sci. 38. 626-630 (1993)
• [文献書誌] Kato N,Omata M et al.: "Quantification of hepatitis C virus by competitive reverse transcription-polymerase chain reaction:increase of the virus in advanced liver disease." Hepatology. 18. 16-20 (1993)
• [文献書誌] Takano S,Omata M et al.: "Prospective asseament of donor blood screening for antibody to hepatitis C virus and high-titer antibody to hepatitis B core antigen as a means of preventing post-transfusion hepatitis." Hepatology. 18. 235-239 (1993)
• [文献書誌] Kato N,Omata M et al.: "Detection of hepatitis C RNA in acute non-A,non-B hepatitis as an early diagnostic tool." Biochem Biophys Res Commun. 192. 800-807 (1993)
• [文献書誌] Yokosuka O,Omata M et al.: "Anti-viral effect of recombinant interferon alfa-2a on hepatitis C virus." Int Hepatol Commun. 1. 128-132 (1993)
• [文献書誌] Chien DY,Omata M et al.: "Use of recombinant HCV antigen in the serodiagnosis of hepatitis C virus infection:Significant improvement in HCV antibody detection as compared with the first generation HCV C100-3 ELISA and the synthetic peptide ETA tests." J Gastroenterology and Hepatology. 8. S33-S39 (1993)
• [文献書誌] Chuang WL,Omata M et al.: "Precore mutations and core clustering mutations in chronic hepatitis B virus infection." Gastroenterology. 104. 263-271 (1993)
• [文献書誌] Yokosuka O,Omata M et al.: "Expression of HCV E2/NS1 protein as a fusion protein with maltose binding protein:detection of anti-E2/NS1 antibody in chronic liver disease." Gut. 34. S64-S65 (1993)
• [文献書誌] Takano S,Omata M et al.: "Prospective assessment of incidence of fulminant hepatitis in post-transfusion hepatitis a study of 504 cases" Dig Dis Sci. 39. 28-32 (1994)