| 研究概要 |
歯周炎の増悪にグラム陰性嫌気性菌が関与していると報告されているが,その関与のメカニズムはまだ十分に明らかにされていない。歯周炎の発病と関連している細菌としてP.gingivalis(Pg),P.intermedia(Pi),A.actinomycetemcomitans(As)などの嫌気性細菌がある。特に、これら嫌気性細菌由来の生物活性物質が歯周炎の発症と関係があるのではないかと考えられている。
従来の研究では、これらの物質を培養条件の同じ細菌から抽出したものではなく個々に調べたものであるため、そのまま生物活性を比較検討することは困難であった。そこで、成人性歯周炎患者歯肉縁下プラークよりPg,Piを、また若年性歯周炎患者歯肉縁下プラークよりAaを分離・同定し、培養条件を一定にしてOuter membrane,Vesicle,Lipopolysaccharide(LPS)を排出・精製し、科学組成及び性状を調べた。また,生物活性を調べる細胞についても従来の多くはヒトより採取しており,個人差などを考慮していなかったが,この欠点を補う必要があると考え,同一ヒトより採取した歯肉・歯根膜由来の線維芽細胞も用いた。それらに3種類の生物活性物質を作用させ、細胞の分裂能及び分化能を系統的に分析した。
その結果、分裂能は刺激濃度に応じて一定の変動がみられ、菌種間ではP1、刺激物間ではVesicleによる変動が大きい傾向が見られた。変動は歯肉・歯根膜由来細胞ともに同様の傾向であった。アルカリフォスファターゼ活性を指標に検討した分化能でも、濃度に応じて同様の傾向がみられたが歯肉由来の線維芽細胞では相対的に活性が低かった。さらに刺激後の線維芽細胞の形態を電子顕微鏡で調べたところ、細胞膜に形態変化が見られた。
これらのことにより統一した条件下で研究を行うことで,より明確に生物活性を検討することができた。
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