| 研究課題/領域番号 |
05640728
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
植物生理
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| 研究機関 | 金沢大学 |
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研究代表者 |
星名 哲 金沢大学, 理学部, 助手 (50019486)
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| 研究期間 (年度) |
1993 – 1994
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| 研究課題ステータス |
完了 (1994年度)
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| 配分額 *注記 |
2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
1994年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1993年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
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| キーワード | α-ヘリックス / アミノ酸シークエンス / 光化学系I / 閃光分光 / トリブシン / 反応中心 / 光阻害 / プラストシアニン / α‐ヘリックス / P700 / 活性酸素 / トリプシン |
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| 研究概要 |
ホウレンソウの光化学系I(系I)複合体で次のような結果を得た。
1.Triton X-100を用いて調整した系I粒子(Chl/P700=200)を強光で照射すると、電子伝達活性の阻害が見られた。この光阻害は酸素に依存し、阻害部位の少なくとも1つは、系Iの第二次電子受容体、A1であるということを明らかにした(論文投稿中)。この系Iの光阻害に伴って、系I反応中心タンパク質、PSI-AとPSI-Bの分解が見られ、それらの分解にも活性酸素が関与していると考えられる(論文準備中)。
2.プラストシアニン(PC)は系IのサブユニットであるPSI-Fと結合することにより、P700に容易に電子を供与できると考えられている。系I粒子とPCとの架橋産物のN-末端アミノ酸シークエンスの分析により、このPSI-Fには2つのPCを結合する部位があるということ明らかにした(論文投稿予定)。
3.系Iコア複合体を閃光照射し、数百フェムト秒〜ピコ秒後の吸光度変化を解析し、緑藻やラン色細菌の系Iコア複合体のものと比較した(論文投稿中)。
4.熱/エチレングリコール処理で得た系I反応中心複合体(PSI-A,-Bと-Kの3つのタンパク質より達成され、P700→→FXまでの反応を行う)をリポソームを再構成した。電子伝達活性の測定により、複合体の90%以上は本来のチラコイド膜の方向性と逆、即ち、P700が外側、受容体FXが内側を向いた反転構造になっていた。この再構成膜をタンパク質分解酵素、トリプシンで処理した後、電気泳動で得られた12のペプチド断片のN-末端アミノ酸シークエンスを調べ、系Iの構造について検討した。PSI-AとPSI-B両サブユニットはHydropathy plotより11カ所のチラコイド膜貫通α-へリックス領域を持つと考えられている。ところが、本研究では、膜貫通領域は8カ所と考えた方が妥当であるという結果を得た。これはラン色細菌の系I複合体のX-線結晶構造解析(まだ解像力は十分でない)で得られたものと一致する(論文準備中)。
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