| 研究課題/領域番号 |
05670103
|
|---|
| 研究種目 |
一般研究(C)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 研究分野 |
薬理学一般
|
|---|
| 研究機関 | 東海大学 |
|---|
研究代表者 |
岡 哲雄 東海大学, 医学部, 教授 (40055976)
|
|---|
| 研究分担者 |
扇谷 信幸 東海大学, 医学部, 講師 (90213652)
松宮 輝彦 東海大学, 医学部, 助教授 (20056203)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
1993
|
| 研究課題ステータス |
完了 (1993年度)
|
| 配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1993年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
|
|---|
| キーワード | プロエンケファリンA mRNA / プロエケンファリンB mRNA / プロオピオメラノコルチンmRNA / 発達 / 消化管 / 遺伝子発現 |
|---|
| 研究概要 |
ラット消化管のプロエンケファリンA(PENK A)、プロエンケファリンB(PENK B)、およびプロオピオメラノコルチン(POMC)などのmRNA量の発達に伴う変化を研究した。
生後5、10、15、20、30、40、および70日目のラットの食道、胃、小腸、盲腸および結腸などを摘出し、グアニジンチオシアネート・塩化セシウム法で全RNAを抽出し、オリゴdTセルロースカラムを用いmRNAを得た。このmRNAを用いアガロースゲル電気泳動を行った後、mRNAをナイロン膜へブロッテングした。そして、3種のオピオイドペプチド前駆体タンパク質mRNAの特定の部位に対応した合成オリゴヌクレオチドの3′末端を^<32>P-alphaATPでテーリングしてプローブとして用い、ハイブリダイゼーション後、-70℃でオートラジオグラフィーを行い、mRNAのバンドを検出するとともに、バイオイメージアナライザーを用いmRNAに相当するバンドの定量を行った。
その結果、胃の単位全mRNA量当たりのPENK A mRNA量は、生後70日目に比べ、生後5、10および15日目では4倍前後多く、その後20日目では2倍前後、30および40日目では1.5倍前後となった。PENK B mRNA量の発達に伴う変化も類似していた。一方、POMC mRNA量は、生後70日目に比べ、生後5、10および15日目の方が少なく、20、30および40日目でほぼ同じになった。すなわち、前回までに明らかにした全脳のmRNA量の変化は、POMCでは類似していて(両者とも発達に伴い徐々に増加する)、PENK AおよびBでは著しく異なる(全脳では徐々に増加するのに対して、胃では5〜15日目に多く、20日目に急激に減少し、その後徐々に減少する)ことが明らかにされた。この原因を目下検討中である。また、胃以外の部位の発達に伴う変化も研究中である。
|
