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ヒスタミンN-メチル基転移酵素活性変動に対する性ステロイドの効果

研究課題

研究課題/領域番号 05670133
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 医化学一般
研究機関兵庫医科大学

研究代表者

竹村 基彦  兵庫医科大学, 医学部, 助教授 (70207009)

研究分担者 堀尾 嘉幸  大阪大学, 医学部, 助手 (30181530)
研究期間 (年度) 1993 – 1994
研究課題ステータス 完了 (1994年度)
配分額 *注記
2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
1994年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
1993年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
キーワードヒスタミン / メチル基転移酵素 / 不活性化 / 分子生物学 / 遺伝子 / S-アデノシルメチオニン / ジアミン酸化酵素 / ヒスタミンン / 酵素定量 / 抗体 / 遺伝子配列 / westem blot / Southern blot
研究概要

1.ラット腎臓におけるヒスタミンN-メチル基転移酵素(HMT)活性の性ステロイドによる制御機構の解明のために,ウェスタンブロット法による酵素タンパク量の定量法を開発した。この方法に用いる抗体は大腸菌で発現させ,完全に精製した組み替え型ラット腎HMTを家兎に免疫することにより作成した。本坑体はラットのみならずマウス,モルモットのHMT活性を免疫沈降し,諸臓器抽出物のウェスタンブロットでラットHMTと近い分子量のタンパクを認識した。ラット,マウス,モルモットのウェスタンブロットでこのタンパクの染色性はHMT活性量と強い正の相関を示した。
2.ラット遺伝子ライブラリーからHMT cDNAをプローブとして陽性クローンを1個単離し,塩基配列を決定した。その結果,このクローンはHMT遺伝子の1部を含み、ラットHMT遺伝子は5個以上のエクソンからなり,全長10.4kb以上であることがわかった。
3.ヒト腎臓cDNAライブラリーからHMT cDNAをクローニングし、全長の塩基配列を決定した。ノザンブロット解析によりヒト上下気道,腎臓におけるHMTの発現を確認した。FISH法によりHMTの遺伝子座を1p32と決定した。ヒト気管・気管支のヒスタミンによる収縮がHMT阻害剤により増強されるがジアミン酸化酵素阻害剤は無影響であることを示し,ヒト気道における内因性ヒスタミンの不活性化は主としてメチル化経路であることを示した。
4.もう一つのヒスタミンの不活性化酵素であるジアミン酸化酵素をラット小腸から精製し、抗体を作成した。本抗体に対する各種哺乳動物の種々の組織中のジアミン酸化酵素の反応性について検討した。

報告書

(3件)
  • 1994 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1993 実績報告書
  • 研究成果

    (8件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (8件)

  • [文献書誌] Takemura,M.: "Tissue distribution of histamine N-methyl-transferase-like immunoreactivity in rodents." Life Sciences. 54. 1059-1071 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yamauchi,K.: "Structure and function of human histamine N-methyltransferase;critical enzyme in histamine metabolism in airway." Am.J.Physiol.267. L342-L349 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mizuguchi,H.: "Purification and characterization of diamine oxidase(histaminase)from rat small intestine." J.Biochem.116. 631-635 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Takemura,M: "Tissue distribution of histamine N-methyltransferaselike immunoreactivity in rodents." Life Sciences. 54. 1059-1971 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] Yamauchi,K: "Structure and function of human histamine N-methyl-transferase;critical enzyme in histamine metabolism" Am.j.Physiol.267. L342-L349 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] Mizuguchi,H.: "Purification and characterization of diamine oxidase(histaminase)from rat small intestine." J.Biochem.116. 631-635 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] M.Takemura: "Tissue distribution of histamine 〓‐methyltransferase‐like immunoreactivity in rodents" Life Sciences. 54. 1059-1071 (1994)

    • 関連する報告書
      1993 実績報告書
  • [文献書誌] K.Yamauchi: "Structure and function of human histamine 〓‐methyl‐transferase" American J.Physiology. (Accepted).

    • 関連する報告書
      1993 実績報告書

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公開日: 1993-04-01   更新日: 2016-04-21  

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