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臓器特異抗原の証明に関する法医学的研究

研究課題

研究課題/領域番号 05670394
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 法医学
研究機関宮崎医科大学

研究代表者

高濱 桂一  宮崎医科大学, 医学部, 教授 (70040160)

研究分担者 湯川 修弘  宮崎医科大学, 医学部, 助手 (30240154)
末富 勝敏  宮崎医科大学, 医学部, 助手 (70235836)
瀬尾 泰久  宮崎医科大学, 医学部, 助手 (80187830)
研究期間 (年度) 1993
研究課題ステータス 完了 (1993年度)
配分額 *注記
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
1993年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
キーワード法医血清学 / 肝特異抗原(LSA) / トロポニンI / スクラーゼ・イソマルターゼ / 酵素免疫測定法 / 肝臓 / 心筋 / 小腸
研究概要

臓器特異抗原を凶器等に附着した血痕から検出することにより、損傷を受けた臓器の特定が可能となるのではなかろうかと考え、肝臓、心筋及び小腸特異抗原の酵素免疫測定法の開発を企図した(高濱、日法医誌、1993)。
1.肝臓:独自に分離同定した肝特異抗原(LSA)について、サンドイッチ酵素免疫測定法を開発し、肝臓損傷をうけた死体における血中濃度の顕著な上昇を認めたが、この方法の検出限界は血痕を対象とした場合は不充分(52pg/tube)であった(瀬尾。高濱、日法医誌、1992)。そこで、固相不溶化抗体と酵素(ペルオキシダーゼ)標識抗体の両者についてアフィニティー精製を試みたところ、検出限界は0.52pg/tubeと大幅に改善され、血痕からのLSAの測定が可能となった(瀬尾、高濱、日法医誌、掲載受理)。また、実験的に肝臓に刺入したメス刃にはかなりの量のLSAが密着することが示され、肝臓が損傷した凶器の法医学的な同定が可能となった。
2.心臓:トロポニンIは免疫源性が弱く力価の高い抗体が得られなかった。しかし従来の方法でアフィニティー精製を行つてもトロポニンIの分子量が小さく、トロポニンIと精製抗体との分離(精製において一部抗体の混入は不可避である)は困難で、バックグランドが上昇し感度の改善は望めない。そこで、分子量を大きくするためトロポニンIと牛血清アルプミンとの複合体を調製し、これによるアフィニティー精製を試みている。
3.小腸:ブタによるモデル実験を通じて、小腸を穿通した刃器の同定がスクラーゼ・イソマルターゼの検出によって可能なことが示された。すなわち、屠殺されたブタの腹部に出刃包丁を刺入し、附着した斑痕をサンドイツチ酵素免疫測定法で測定した。抗体のアフィニティー精製は行っていない(検出限界、27pg/tube)が、腸管内のスクラーゼ・イソマルターゼが比較的豊富なため、腸管穿通刃器からの検出は充分可能であった。

報告書

(1件)
  • 1993 実績報告書
  • 研究成果

    (1件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (1件)

  • [文献書誌] Yasuhisa Seo: "A highly sensitive sandwich enzyme immunoassay for human liver-specific antigen(LSA)and its fcrensic application." Japanese Journal of Legal Medicine(日本法医学雑誌). 48(掲載受理). (1994)

    • 関連する報告書
      1993 実績報告書

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公開日: 1993-04-01   更新日: 2016-04-21  

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