| 研究課題/領域番号 |
05680588
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
分子生物学
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
渡辺 嘉典 東京大学, 大学院・理学系研究科, 助手 (20212326)
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| 研究分担者 |
山本 正幸 東京大学, 大学院・理学系研究科, 教授 (40114706)
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| 研究期間 (年度) |
1993 – 1994
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| 研究課題ステータス |
完了 (1994年度)
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| 配分額 *注記 |
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1994年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
1993年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
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| キーワード | 減数分裂 / RNA / RNA結合モチーフ / 減数分裂過前DNA合成 / 減数第一分裂 / 分裂酵母 / 減数分裂前DNA合成 / RNA結合タンパク質 / キナーゼ |
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| 研究概要 |
分裂酵母のmei2遺伝子の過剰発見は、細胞の増殖を阻害し、それだけで減数分裂の誘導をきたす。我々は、Mei2が、減数分裂前DNA合成の開始のみならずその後の減数第一分裂の開始にも必須の機能を果たすことを明らかにし、減数分裂過程全般にわたる制御因子である可能性を示した。
一方mei2温度感受性変異の多コピー・サプレッサーとして単離されたsme2遺伝子が、RNAとして働いていることを証明した。また、その一次構造も詳細に解析し、今までに例を見ない新規のRNAであることを明らかにした。さらに我々は、遺伝解析によりこのRNAが減数分裂(meiosis)に必須の因子であることを示し、meiRNAと命名した。
減数分裂制御因子Mei2にRNA結合モチーフ様の配列があることから、Mei2、meiRNA両産物の直接的な相互作用の可能性が考えられた。クローン化したmei2遺伝子をもとに、大腸菌を用いてGST融合Mei2タンパク質を合成し、RNAをプローブとしてゲルシフトアッセイ法を行った結果、Mei2がRNA結合タンパク質であることが証明された。またcDNAを鋳型に合成したmeiRNAはin vitroでMei2タンパク質と特異的に結合することも判明した。さらに、酵母細胞抽出液のMei2抗体による免疫沈降物中にmeiRNAが存在することができ、in vivoにおけるMei2とmeiRNAとの直接的な相互作用も証明された。
以上の解析から、分裂酵母の減数分裂の制御にRNA-タンパク質複合体が重要な機能を果たしていることが明らかとなった。
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