| 研究課題/領域番号 |
05680610
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
細胞生物学
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
平芳 一法 京都大学, 胸部疾患研究所, 助手 (80199108)
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| 研究期間 (年度) |
1993
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| 研究課題ステータス |
完了 (1993年度)
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| 配分額 *注記 |
2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
1993年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
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| キーワード | ストレス蛋白質 / コラーゲン / transtection |
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| 研究概要 |
HSP47は、コラーゲンの発現量に相関した発現を示す。発現調節を考えるうえで大きな興味となるのは、コラーゲンそのものがHSP47を誘導するためのシグナルそのものになり得るか否かである。このことを示唆するデータとしてV型コラーゲンを微量産生しているCHL細胞(Chinese hamster lung cell)にI型コラーゲンのal(I)鎖のみをstableにtransfectした細胞と、α1(I)およびα2(I)をstableにtransfectした細胞を用いて、HSP47の発現量を比較した。HSP47の発現は、コラーゲンの発現量が増加するにしたがって増加し、細胞外に分泌されにくいα1(I)のホモトライマーをさんせいしている細胞でより多くの増加が観察された。この事実は、コラーゲンそのものがHSP47を誘導するシグナルそのものであることを示唆するものである。さらにこの事実を検証するため、種々の変異を導入したコラーゲン遺伝子をtransientに発現する系を確立した。
同時にHSP47の転写調節領域におけるコラーゲン反応部位を検索するため、定法どおり欠損変異による突然変異体を作成し、レポーター遺伝子につなぎ細胞に導入した。細胞によっては、正常な状態でのCAT活性の回収が非常に悪く、transientによる解析が困難であった。導入する細胞として上述のCHL細胞を用いることにより、非ストレス下でもCAT活性を回収することが可能となった。現在、コラーゲンとHSP47プロモーター遺伝子のco-transfectionによりコラーゲンの変動に伴うHSP47の発現調節部位の同定を試みている。
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